硫酸軟骨素制備工藝改進(jìn).pdf

1、硫酸軟骨素(chondroitin sulfate，CS)是一類硫酸化酸性黏多糖(acidmucopolysaccharide)，重復(fù)二糖單位是[→4GlcUAβ1→3GalNAcβ1→]。根據(jù)單糖組成的不同及硫酸基位置、數(shù)量的不同，CS可分為CS-A、CS-B、CS-C、CS-D、CS-E等類別。
　　CS在醫(yī)藥、醫(yī)用生物材料、功能食品等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，其作為藥物或膳食補(bǔ)充劑用于心血管疾病、眼科疾病、骨關(guān)節(jié)炎等。中國藥典2010年

2、版中CS主要有3個來源，即豬的喉骨、鼻中骨、氣管等軟骨組織;此外還有海洋動物的軟骨，牛、鳥類及人類食用家禽類的軟骨等。CS結(jié)構(gòu)具有高度的不均一性，早期認(rèn)為CS-A、CS-C是分別存在的，一般認(rèn)為CS-A多存在于陸生哺乳動物軟骨中，CS-C多存在于海洋脊椎動物軟骨中。不同種屬、不同組織來源的CS結(jié)構(gòu)和含量差異較大，生理功能也有差異，導(dǎo)致不同來源CS制劑臨床效果差異問題出現(xiàn)。
　　國內(nèi)CS生產(chǎn)應(yīng)用較多的是堿性酶解法，此法酶解效率較高，

3、生產(chǎn)周期較短，生產(chǎn)中使用的酸、堿、鹽量少。但此法需大量乙醇，采用此法生產(chǎn)的CS含量一般在90％以下。離子交換色譜法是利用離子交換劑與不同離子間結(jié)合能力的差異，將溶液中的某些離子吸附在交換劑上，而不能被吸附的成分直接被洗脫下來，實現(xiàn)分離提純的目的。
　　本論文研究改進(jìn)了CS的制備工藝:酶解過程采用堿性脂肪酶和堿性蛋白酶共同作用，酶解脂肪和蛋白質(zhì)，減少雜質(zhì);純化過程采用離子交換色譜法，考察不同樹脂的精制效果;采用中國藥典2010年版關(guān)

4、于CS含量測定的酶解-液相法分別檢測豬鼻骨、豬氣管、豬喉骨來源以及牛、鯊魚、雞來源的CS二糖含量差異。主要研究結(jié)果如下。
　　1.建立堿性脂肪酶酶解條件:脂肪酶濃度6U/mL，酶解時間30min，作用溫度50℃，pH9。
　　2.分別考察了3種樹脂:D201、Amberlite IRA-910、FPA94C1精制CS的效果。結(jié)果表明:FPA94C1樹脂對于CS精制有較好的效果。
　　3.建立了離子交換色譜法從豬軟骨酶解

5、液中分離純化CS的工藝條件:
　　(1)采用FPA94Cl陰離子交換樹脂純化CS。
　　(2)靜態(tài)吸附條件:初始濃度30mg/mL，pH6，25℃，吸附時間10h，洗脫溶劑6mol/L氯化鈉溶液。
　　(3)動態(tài)吸附條件:初始濃度30mg/mL，上樣pH6，25℃，上樣流速1bv/h;洗脫溶劑6mol/L氯化鈉溶液，洗脫流速0.3bv/h。
　　洗脫液通過一次醇沉，得到高品質(zhì)的CS，純度達(dá)95％。
　　4.