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文檔簡介
1、玉米蛋白粉也叫玉米麩質粉,是工業(yè)上提取玉米淀粉的副產品。隨著玉米蛋白粉產量的不斷增加,玉米的深加工及綜合利用已被列為未來10項農副產品開發(fā)的重點。利用玉米蛋白開發(fā)血管緊張素轉化酶(ACE)抑制劑具有較大潛力,隨著其高附加值產品的不斷開發(fā),將有一個良好的商業(yè)前景,從而產生更大的經濟和社會效益。
近年來,高血壓已成為危害人類健康的一大殺手。但高血壓的知曉率、治療率及控制率都不高,我國已成為世界上高血壓危害最嚴重的國家之一,所以
2、利用食物蛋白源開發(fā)ACE抑制肽具有廣闊的前景。本文選用玉米蛋白作為ACE抑制肽的蛋白源。
傳統(tǒng)的酶解蛋白制備多肽技術存在許多不足,對于組成和結構較特殊的蛋白,如玉米蛋白,酶解效率通常都很低。因此,在酶解前對蛋白做適當預處理是很必要的。故本文采用掃頻超聲技術對玉米蛋白進行預處理,研究其對玉米蛋白酶解特性的影響。
為了探索掃頻超聲技術促進蛋白質酶解反應的效果,首先進行單因素優(yōu)化試驗來尋找最佳掃頻超聲工作模式、超聲
3、預處理參數和最佳酶解條件。研究結果發(fā)現,掃頻超聲最佳工作模式為(40±2)kHz/(68±2)kHz,局部優(yōu)化得到的最佳的掃頻超聲預處理條件為:單位體積超聲功率54.5W/L,超聲掃頻周期500ms,脈沖超聲工作時間10s、間歇時間3s,蛋白濃度4.5%,超聲初始溫度20℃左右,超聲處理時間40min。在酶解溫度50℃、酶解pH9.0的前提下,使用堿性蛋白酶Alcalase2.4LFG進行酶解,獲得最佳的酶解條件為:底物濃度4.5%,水
4、解加酶量5616U/g(E/S),酶解時間50min。在最佳的超聲預處理及最佳的酶解條件下,ACE抑制率為48.48%、水解度為11.20%,酶解產物的IC50值為3.77mg/mL,比傳統(tǒng)酶解(無超聲處理)降低了31.20%,產品得率為66.15%,比傳統(tǒng)酶解提高了14.39%。這表明掃頻超聲預處理能夠有效地促進玉米蛋白的酶解反應,提高產物的ACE相對抑制活性。
本文同時采用均勻設計法進行優(yōu)化,對比性地研究均勻設計法與傳
5、統(tǒng)單因素法對優(yōu)化試驗效果的差異。研究結果表明,均勻設計法獲得的最佳工藝條件為:底物濃度4.5%,酶解時間55min,單位體積超聲功率46.2W/L,脈沖超聲工作時間10s,脈沖超聲間歇時間7s,超聲掃頻周期550ms,超聲處理時間40min,超聲初始溫度20℃左右,加酶量8424U/g(E/S)。結果證明,兩種方法獲得的工藝條件很接近。
以玉米蛋白為底物,在前面研究的基礎上,研究掃頻超聲輔助Alcalase2.4LFG酶解
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