油酰海藻酸納米?？诜\(yùn)送載體的制備與性質(zhì)研究.pdf

1、納米載體系統(tǒng)能夠改善營養(yǎng)物質(zhì)的溶解性、穩(wěn)定性、生物利用度等性質(zhì)。海藻酸鈉具有良好的生物可降解性和生物相容性，在食品醫(yī)藥領(lǐng)域都得到了廣泛應(yīng)用。本論文首先制備得到了油酰海藻酸，并且分別用超聲輔助分子自組裝法和乳化法構(gòu)建了油酰海藻酸納米粒，在納米粒中分別包埋了維生素D3和維生素E，并研究了包埋效率和緩釋效果。最后以Caco-2細(xì)胞模型和外翻腸模型，考察了生物相容性、吸收和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)作用。
　　 首先，在無有機(jī)溶劑的條件下，將油?；鶊F(tuán)接枝

2、到海藻酸分子上，制備得到油酰海藻酸(OAE)，利用紅外光譜和核磁共振的方法檢測酯化產(chǎn)物的形成。然后用響應(yīng)面分析的方法對合成過程進(jìn)行了優(yōu)化，經(jīng)優(yōu)化得到的最佳試驗(yàn)參數(shù)為：4.95ml甲酸，11.27 ml油酰氯，反應(yīng)時間20 min，反應(yīng)溫度50℃。此時取代度為5％，產(chǎn)率93.99％。經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，在以上最優(yōu)條件下，所得產(chǎn)品的取代度為4.93％，產(chǎn)率92.27％，與軟件優(yōu)化結(jié)果基本相符。
　　 通過超聲輔助分子自組裝法制備得到OAE納

3、米粒，利用熒光光譜技術(shù)、透射電子顯微鏡、動態(tài)激光散射粒度儀對納米粒的理化性質(zhì)進(jìn)行了測定，并且研究了OAE納米粒在模擬胃腸液中的穩(wěn)定性。結(jié)果表明得到了球形規(guī)則、形態(tài)完整、粒徑較小的納米粒。隨著OAE取代度增加，OAE納米粒的粒徑由559.3±9.5 nm降到305.3±6.3 nm，臨界聚集濃度(CAC)由0.38 mg/ml降到0.25 mg/ml。與蒸餾水中相比，OAE納米粒在模擬胃液中仍然保持完整球形結(jié)構(gòu)，在模擬腸液中的形狀變得不規(guī)

4、則。OAE納米粒在模擬胃液中的粒徑變小，模擬腸液中的粒徑變大。OAE納米粒在模擬胃液中，具有較高的熱力學(xué)穩(wěn)定性，在模擬腸液中具有較低的熱力學(xué)穩(wěn)定性。
　　 以VD3為模式營養(yǎng)物，利用超聲輔助分子自組裝法將其包埋到納米粒中。隨著加入VD3量的增多，OAE納米粒的包封率從67.6±2.76％降低到45.8±1.55％，負(fù)載率從0.33±0.02升高至0.91±0.03％。并且研究了在模擬胃腸液中的緩釋，結(jié)果表明納米粒具有緩釋作用。<

5、br>　　 以VE為模式營養(yǎng)物，分別利用超聲法和乳化法制備得到了載VE的OAE納米粒，兩者都能制備得到納米粒，但納米乳劑具有比較高的載VE的能力。
　　 通過離心的方法將納米粒進(jìn)行分級分離，些過程受到納米粒Zeta電位、離心速度的影響，zeta電位的絕對值越小，離心速度越快，納米粒的沉降越快。本章還通過差速離心的方法將一組納米粒按照大小分成了四組組米粒。隨著離心速度升高，粒徑從707.2±32.3 nm降到78.2±19.9

6、nm，負(fù)載率從12.35±1.92％降低至4.94±0.46％，它們的PDI值均小于0.47±0.03。
　　 通過離心的方法成功分離出四組粒徑大小不同的納米粒，它們具有相似的zeta電位，粒徑大的納米粒具有較高的載VE的能力。并且研究了粒徑對VE的穩(wěn)定性、納米粒的分散穩(wěn)定性的影響。隨著粒徑降低，VE的穩(wěn)定性升高，納米粒的分散穩(wěn)定性提高。
　　 利用MTT法檢測了OAE納米粒的粒徑對細(xì)胞毒性的影響，結(jié)果表明四組納米粒對細(xì)

7、胞均無毒。Transwell的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)表明，OAE納米粒能夠提高VE的透過性。隨著粒米粒的粒徑從80 nm升高到700 nm，表觀滲透系數(shù)從2.72±0.66×10-4降至0.94±0.43×10-4cm/s。
　　 利用wistar大鼠腸環(huán)外翻法研究了OAE納米粒的細(xì)胞吸收和胞吞機(jī)制。4℃的吸收遠(yuǎn)低于37℃，此結(jié)果表明納米粒主要通過主動運(yùn)輸吸收。NP80和NP130主要通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用吸收，NP370主要通過小凹