自組裝透明質(zhì)酸納米粒作為天冬酰胺酶運(yùn)送載體的研究.pdf

1、蛋白質(zhì)和多肽藥物是生物大分子，在臨床使用的過(guò)程中非常容易變性導(dǎo)致失活。因此，應(yīng)用藥物載體或運(yùn)輸系統(tǒng)提高其穩(wěn)定性就顯得非常有必要。藥物運(yùn)載體在提高藥物的穩(wěn)定性療效方面有許多優(yōu)點(diǎn)，例如，可以提高蛋白質(zhì)/多肽在水溶液中的穩(wěn)定性;控制蛋白質(zhì)/多肽分子的釋放，以持續(xù)的緩釋避免突釋帶來(lái)的副作用。透明質(zhì)酸(HA)，是一種高分子(105-107Da)天然粘多糖，廣泛存在于體液和組織中。由于生物可降解性、低的免疫原性，HA是作為藥物緩釋載體的理想材料。天

2、冬酰胺酶是治療急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)和其它造血系統(tǒng)惡性腫瘤的藥物。天冬酰胺酶能夠催化天冬酰胺轉(zhuǎn)化為天冬氨酸和氨。然而作為一種外源蛋白，天冬酰胺酶在臨床使用中會(huì)過(guò)早失活、被快速清除，需要反復(fù)注射來(lái)維持治療水平，導(dǎo)致免疫應(yīng)答反應(yīng)。因此，可以通過(guò)將天冬酰胺酶包埋入載體來(lái)增長(zhǎng)酶在血液循環(huán)中的半衰期。
　　采取活性酯法制備脫氧膽酸酸化透明質(zhì)酸，通過(guò)控制脫氧膽酸的加入量制得不同取代度的HD耦合物。隨著HD耦合物中氨基化脫氧膽酸的增加，取

3、代度增加，耦合物的平均分子量也相應(yīng)的增加。應(yīng)用超聲法制備自組裝納米粒懸液，用動(dòng)態(tài)光散射儀進(jìn)行了粒徑大小和粒度分布檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)不同取代度HD耦合物超聲得到的納米粒徑數(shù)值也不同。Zeta電位是表征表面電荷的重要指標(biāo)，取代度不同的HD納米耦合物Zeta數(shù)值均為負(fù)值，并且相差不大。隨后檢測(cè)稀釋濃度、儲(chǔ)存時(shí)間、外界環(huán)境pH、離子強(qiáng)度和疏水強(qiáng)度等不同條件對(duì)HD耦合物穩(wěn)定性有一定的影響。
　　將天冬酰胺酶包載于納米粒中，測(cè)試了HD納米粒包載藥物天

4、冬酰胺酶的載藥量和包封率，隨著天冬酰胺酶加入量的增加，HD耦合物納米溶液的載藥量增加，包封率降低。通過(guò)對(duì)天冬酰胺酶體外釋放的研究，得出取代度越大，藥物釋放越緩慢，緩釋效果越好。驗(yàn)證了不同離子強(qiáng)度對(duì)HD納米粒載藥量的影響，說(shuō)明納米粒和酶分子之間存在著疏水相互作用。對(duì)所使用材料的血液相容性做了測(cè)試，證明材料生物相容性好。
　　通過(guò)對(duì)比天冬酰胺酶和自組裝納米粒天冬酰胺酶復(fù)合物酶的酶活力性質(zhì)的差別，探究了不同反應(yīng)溫度和不同酸堿度對(duì)復(fù)合酶和