沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的制備及口服吸收研究.pdf

1、固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles，SLN)是近年來在藥劑學領(lǐng)域研究比較熱門的一類新型的納米載體，因其具有生物相容性好，提高藥物穩(wěn)定性，調(diào)控藥物釋放行為，可實現(xiàn)藥物靶向傳遞，及適合工業(yè)生產(chǎn)等特性從而受到廣泛關(guān)注。近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，固體脂質(zhì)納米粒作為口服藥物載體，可以有效提高藥物的口服吸收和生物利用度。本研究針對抗HIV藥物沙奎那韋口服生物利用度低的問題，利用低毒性、生物相容性好、生物可降解的單甘脂為脂質(zhì)材

2、料，制備沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒，并開展聚乙二醇的研究，并考察其作為口服藥物載體，在大鼠體內(nèi)的藥代動力學行為，以期為開發(fā)沙奎那韋新型給藥系統(tǒng)提供實驗依據(jù)。
　　本研究選用沙奎那韋為模型藥物，首先通過離子復(fù)合法制備沙奎那韋-卵磷脂復(fù)合物，采用差示熱掃描法(DSC)確證復(fù)合物的結(jié)構(gòu);以單甘脂為脂質(zhì)材料，采用溶劑擴散法，制備沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒，通過聚乙二醇—硬脂酸(PEG2000-SA)投料量的調(diào)控，研究不同聚乙二醇修飾比例的沙奎那韋

3、固體脂質(zhì)納米粒的粒徑大小及形態(tài)、藥物包封率、載藥量及藥物體外釋放等理化性質(zhì)。結(jié)果表明:當沙奎那韋與卵磷脂的質(zhì)量比為1∶1.5時，沙奎那韋可與卵磷脂有效復(fù)合，形成沙奎那韋-卵磷脂復(fù)合物;通過粒徑儀測定和透射電鏡的觀察，發(fā)現(xiàn)未經(jīng)PEG修飾的SLN粒徑在275 nm左右，隨著PEG修飾量的增加粒徑減小;當PEG修飾比例為10％時，其粒徑為158 nm左右;水溶性藥物沙奎那韋與卵磷脂復(fù)合后，可被脂質(zhì)材料有效包封，沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的藥物包封

4、率為99.19％，載藥量可達19.87％，聚乙二醇修飾后其藥物包封率有所下降，但仍在95％以上;體外釋放結(jié)果顯示沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒對藥物具有緩釋作用，72小時的藥物累積釋放量為19.23％，且其釋放速率隨著聚乙二醇的修飾比例的增加而減緩。建立HPLC測定沙奎那韋血藥濃度的方法學。采用SD大鼠為模型動物，以沙奎那韋混懸劑為對照，考察沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒及不同比例聚乙二醇修飾SLN口服給藥后，在大鼠體內(nèi)的藥代動力學行為。研究結(jié)果顯示:

5、大鼠口服沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒、5％聚乙二醇修飾SLN(pSLN-5％)和10％聚乙二醇修飾SLN(pSLN-10％)的相對于口服沙奎那韋混懸液的生物利用度分別為200.68％，6175.85％，10115.35％，其口服相對生物利用度隨著聚乙二醇修飾比例的增加而增加。相比于沙奎那韋混懸劑，pSLN-5％和pSLN-10％，其體內(nèi)平均滯留時間從4.62小時，增加到36.21小時和51.68小時;其Cmax從0.33mg/L增加到，7.4

6、6mg/L和8.42mg/L。結(jié)果表明固體脂質(zhì)納米粒通過PEG修飾可顯著延長藥物的體內(nèi)滯留時間，增加藥物轉(zhuǎn)運效率，降低藥物的消除速率，可大幅度地提高沙奎那韋的口服生物利用度。為闡明固體脂質(zhì)納米粒及其聚乙二醇修飾SLN(pSLN)提高沙奎那韋口服生物利用度的機制，進一步采用犬腎上皮連續(xù)細胞系(MDCK)作為體外跨膜轉(zhuǎn)運吸收的評價模型細胞，以四唑藍比色(MTT)法測定固體脂質(zhì)納米粒及其聚乙二醇修飾SLN的細胞毒性;培養(yǎng)MDCK細胞單層，以沙

7、奎那韋混懸劑為對照，評價SLN及pSLN的跨膜轉(zhuǎn)運能力;以異硫氫基熒光素標記SLN及pSLN研究納米粒的MDCK細胞攝取能力。細胞毒性研究結(jié)法果顯示:沙奎那韋的固體脂質(zhì)納米粒對MDCK細胞的半數(shù)致死率(IC50)為269.02μg/mL，聚乙二醇修飾后其毒性進一步降低，采用5％和10％聚乙二醇修飾的SLN，其IC50分別為549.25和550.47μg/mL?？缂毎麊螌幽まD(zhuǎn)運結(jié)果表明:相比于沙奎那韋溶液，SLN具有加強的跨細胞單層膜轉(zhuǎn)運

8、能力，其Papp分別為0.09×10-5cm/s、0.18×10-5cm/s，且隨著聚乙二醇修飾比例的增加而提高，10％聚乙二醇修飾SLN(pSLN-10％)的Papp為0.40×10-5cm/s。MDCK細胞攝取研究結(jié)果表明:SLN具有較強的MDCK細胞攝取和轉(zhuǎn)運能力，且其攝取和轉(zhuǎn)運能力隨著聚乙二醇修飾比例的增加而增加。研究表明，結(jié)合離子復(fù)合和溶劑擴散法制備的固體脂質(zhì)納米粒，可實現(xiàn)對水溶性藥物沙奎那韋的有效包封和高效負載，并可通過胃腸