沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的制備及口服吸收研究.pdf

1、固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles，SLN)是近年來在藥劑學(xué)領(lǐng)域研究比較熱門的一類新型的納米載體，因其具有生物相容性好，提高藥物穩(wěn)定性，調(diào)控藥物釋放行為，可實(shí)現(xiàn)藥物靶向傳遞，及適合工業(yè)生產(chǎn)等特性從而受到廣泛關(guān)注。近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，固體脂質(zhì)納米粒作為口服藥物載體，可以有效提高藥物的口服吸收和生物利用度。本研究針對(duì)抗HIV藥物沙奎那韋口服生物利用度低的問題，利用低毒性、生物相容性好、生物可降解的單甘脂為脂質(zhì)材

2、料，制備沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒，并開展聚乙二醇的研究，并考察其作為口服藥物載體，在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為，以期為開發(fā)沙奎那韋新型給藥系統(tǒng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　本研究選用沙奎那韋為模型藥物，首先通過離子復(fù)合法制備沙奎那韋-卵磷脂復(fù)合物，采用差示熱掃描法(DSC)確證復(fù)合物的結(jié)構(gòu);以單甘脂為脂質(zhì)材料，采用溶劑擴(kuò)散法，制備沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒，通過聚乙二醇—硬脂酸(PEG2000-SA)投料量的調(diào)控，研究不同聚乙二醇修飾比例的沙奎那韋

3、固體脂質(zhì)納米粒的粒徑大小及形態(tài)、藥物包封率、載藥量及藥物體外釋放等理化性質(zhì)。結(jié)果表明:當(dāng)沙奎那韋與卵磷脂的質(zhì)量比為1∶1.5時(shí)，沙奎那韋可與卵磷脂有效復(fù)合，形成沙奎那韋-卵磷脂復(fù)合物;通過粒徑儀測(cè)定和透射電鏡的觀察，發(fā)現(xiàn)未經(jīng)PEG修飾的SLN粒徑在275 nm左右，隨著PEG修飾量的增加粒徑減小;當(dāng)PEG修飾比例為10％時(shí)，其粒徑為158 nm左右;水溶性藥物沙奎那韋與卵磷脂復(fù)合后，可被脂質(zhì)材料有效包封，沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的藥物包封

4、率為99.19％，載藥量可達(dá)19.87％，聚乙二醇修飾后其藥物包封率有所下降，但仍在95％以上;體外釋放結(jié)果顯示沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒對(duì)藥物具有緩釋作用，72小時(shí)的藥物累積釋放量為19.23％，且其釋放速率隨著聚乙二醇的修飾比例的增加而減緩。建立HPLC測(cè)定沙奎那韋血藥濃度的方法學(xué)。采用SD大鼠為模型動(dòng)物，以沙奎那韋混懸劑為對(duì)照，考察沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒及不同比例聚乙二醇修飾SLN口服給藥后，在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為。研究結(jié)果顯示:

5、大鼠口服沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒、5％聚乙二醇修飾SLN(pSLN-5％)和10％聚乙二醇修飾SLN(pSLN-10％)的相對(duì)于口服沙奎那韋混懸液的生物利用度分別為200.68％，6175.85％，10115.35％，其口服相對(duì)生物利用度隨著聚乙二醇修飾比例的增加而增加。相比于沙奎那韋混懸劑，pSLN-5％和pSLN-10％，其體內(nèi)平均滯留時(shí)間從4.62小時(shí)，增加到36.21小時(shí)和51.68小時(shí);其Cmax從0.33mg/L增加到，7.4

6、6mg/L和8.42mg/L。結(jié)果表明固體脂質(zhì)納米粒通過PEG修飾可顯著延長藥物的體內(nèi)滯留時(shí)間，增加藥物轉(zhuǎn)運(yùn)效率，降低藥物的消除速率，可大幅度地提高沙奎那韋的口服生物利用度。為闡明固體脂質(zhì)納米粒及其聚乙二醇修飾SLN(pSLN)提高沙奎那韋口服生物利用度的機(jī)制，進(jìn)一步采用犬腎上皮連續(xù)細(xì)胞系(MDCK)作為體外跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)吸收的評(píng)價(jià)模型細(xì)胞，以四唑藍(lán)比色(MTT)法測(cè)定固體脂質(zhì)納米粒及其聚乙二醇修飾SLN的細(xì)胞毒性;培養(yǎng)MDCK細(xì)胞單層，以沙

7、奎那韋混懸劑為對(duì)照，評(píng)價(jià)SLN及pSLN的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)能力;以異硫氫基熒光素標(biāo)記SLN及pSLN研究納米粒的MDCK細(xì)胞攝取能力。細(xì)胞毒性研究結(jié)法果顯示:沙奎那韋的固體脂質(zhì)納米粒對(duì)MDCK細(xì)胞的半數(shù)致死率(IC50)為269.02μg/mL，聚乙二醇修飾后其毒性進(jìn)一步降低，采用5％和10％聚乙二醇修飾的SLN，其IC50分別為549.25和550.47μg/mL?？缂?xì)胞單層膜轉(zhuǎn)運(yùn)結(jié)果表明:相比于沙奎那韋溶液，SLN具有加強(qiáng)的跨細(xì)胞單層膜轉(zhuǎn)運(yùn)

8、能力，其Papp分別為0.09×10-5cm/s、0.18×10-5cm/s，且隨著聚乙二醇修飾比例的增加而提高，10％聚乙二醇修飾SLN(pSLN-10％)的Papp為0.40×10-5cm/s。MDCK細(xì)胞攝取研究結(jié)果表明:SLN具有較強(qiáng)的MDCK細(xì)胞攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)能力，且其攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)能力隨著聚乙二醇修飾比例的增加而增加。研究表明，結(jié)合離子復(fù)合和溶劑擴(kuò)散法制備的固體脂質(zhì)納米粒，可實(shí)現(xiàn)對(duì)水溶性藥物沙奎那韋的有效包封和高效負(fù)載，并可通過胃腸