我國(guó)野生菰米的血糖生成指數(shù)及其調(diào)控脂毒性改善大鼠胰島素抵抗的作用.pdf

1、目的:(1)了解我國(guó)野生菰米的血糖生成指數(shù)，為糖尿病病人的日常膳食指導(dǎo)與應(yīng)用提供參考依據(jù)。(2)觀察我國(guó)野生菰米對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠的血脂血糖水平、炎性因子和脂肪因子含量的影響，胰島β細(xì)胞葡萄糖刺激胰島素分泌(GSIS)功能和胰島β細(xì)胞胰島素合成能力，肝臟組織中過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（PPA Rα)、胰島素受體底物1(IRS-1)、胰島素受體底物2(IRS-2)、核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)和脂肪組織中過(guò)氧化物酶體增殖物激活受

2、體（PPARγ）、胰島素受體底物1(IRS-1)、胰島素受體底物2(IRS-2)、核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB) mRNA表達(dá)水平的影響，探討我國(guó)野生菰米如何通過(guò)調(diào)控脂毒性改善胰島素抵抗的作用，為發(fā)現(xiàn)新的作用靶點(diǎn)以及菰米用以營(yíng)養(yǎng)干預(yù)防止和延緩T2DM提供新的理論依據(jù)。
　　方法:(1)8位受試者空腹10-14小時(shí)后，清晨抽取靜脈血，然后再分別抽取服用口服葡萄糖溶液后以及食用熟制菰米后第15、30、45、60、90、120min時(shí)的靜脈血

3、，并測(cè)定血清葡萄糖濃度，利用Jenkins和Wolever公式，繪制AUC曲線圖，依據(jù)血糖曲線下增值面積比，計(jì)算并分析我國(guó)野生菰米的血糖生成指數(shù)GI。(2)50只雄性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，斷尾采血，分離出血清，測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)。根據(jù)血糖水平，將試驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成陰性對(duì)照組(N)、胰島素抵抗模型組(Y)、

4、高劑量菰米組(G)、低劑量菰米組(D)和米面組(M)。(3)在AIN-93動(dòng)物合成飼料配方的基礎(chǔ)上適當(dāng)調(diào)整蛋白質(zhì)和蔗糖的比例，增加飽和脂肪酸的含量，同時(shí)用菰米粉、大米粉和面粉按一定比例代替高脂飼料中蔗糖和淀粉部分，配制成高劑量菰米組、低劑量菰米組和米面組飼料。陰性對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼料，其他四組分別給予高脂飼料、高劑量菰米飼料、低劑量菰米飼料和米面飼料。(4)按以上飼料供給，連續(xù)喂養(yǎng)8周，每2周尾靜脈采血測(cè)定大鼠FPG、FINS、TC、TG

5、、HDL-C和LDL-C;實(shí)驗(yàn)結(jié)束后頸椎脫臼處死大鼠，股動(dòng)脈取血測(cè)定游離脂肪酸(FFAs)、糖化血紅蛋白(GHbAIc)、胰高血糖素(GC)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、脂聯(lián)素(ADP)、瘦素(Lep)、抵抗素(Res)，并分離出肝臟、脾臟、腎周和睪周脂肪，稱重，計(jì)算臟體比和脂體比，同時(shí)檢測(cè)各組大鼠肝臟組織病理學(xué)的改變。計(jì)算大鼠的胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)和敏感指數(shù)(IS

6、I)。(5)采用Dextran密度梯度離心法分離純化大鼠胰島，然后分別在含5.5 mmol/L和27.0 mmol/L葡萄糖濃度的RPMI1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)48h，收集培養(yǎng)液和胰島β細(xì)胞以測(cè)定大鼠葡萄糖刺激胰島素分泌GSIS及胰島β細(xì)胞內(nèi)胰島素的含量。(6)運(yùn)用半定量RT-PCR技術(shù)測(cè)定大鼠肝組織中PPAR、IRS-1、IRS-2、NF-κB及大鼠脂肪組織中PPARγ、IRS-1、I RS-2、NF-κB mRNA的表達(dá)。
　　

7、結(jié)果:(1)我國(guó)野生菰米的血糖生成指數(shù)GI為53.72。(2)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與胰島素抵抗模型組、米面組大鼠相比，高劑量菰米組大鼠的體重、FPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、內(nèi)臟脂肪重量及臟體脂體比、FFAs、GHbAlc、GC，hs-CRP、TNF-α、IL-6、Lep、Res水平均明顯下降(P＜0.05），HDL-C、ADP以及ISI水平均明顯上升(P＜0.05）;高劑量菰米組、低劑量菰米組和陰性對(duì)照組之間無(wú)顯著性差異(

8、P＞0.05），且高劑量菰米組對(duì)血脂血糖的改善作用優(yōu)于低劑量菰米組;米面組與胰島素抵抗模型組水平相當(dāng)。實(shí)驗(yàn)大鼠HE切片結(jié)果顯示，菰米組可以顯著減輕大鼠肝臟脂肪變性和炎性程度，并且高劑量菰米組要比低劑量菰米組效果明顯。(3)與陰性對(duì)照組相比，胰島素抵抗模型組和米面組大鼠胰島β細(xì)胞葡萄糖刺激胰島素分泌GSIS功能明顯下降（P＜0.05）;高劑量菰米組、低劑量菰米組與陰性對(duì)照組之間GSIS功能無(wú)顯著差異(P＞0.05)，且高劑量菰米組GSIS

9、功能高于低劑量菰米組;米面組接近胰島素抵抗模型組。(4)高劑量菰米組較胰島素抵抗模型組、米面組大鼠肝臟組織中PPARα、IRS-1、IRS-2表達(dá)顯著升高(P＜0.05)，NF-κB表達(dá)顯著下降(P＜0.05)，脂肪組織中PPARγ、IRS-1、IRS-2表達(dá)顯著升高(P＜0.05)，NF-κB表達(dá)顯著下降（P＜0.05）;高劑量菰米組、低劑量菰米組和陰性對(duì)照組之間表達(dá)水平無(wú)顯著差異（P＞0.05）;米面組和胰島素抵抗模型組表達(dá)水平相當(dāng)