脂聯(lián)素及其受體在胰島素抵抗中的作用初探.pdf

1、目的:從人體、動(dòng)物、細(xì)胞三個(gè)水平進(jìn)行研究，初步闡明脂聯(lián)素及其受體在胰島素抵抗發(fā)生中的意義，以及吡格列酮對(duì)脂聯(lián)素及其受體表達(dá)的影響。本研究共包括以下四部分內(nèi)容：1、老年糖耐量異常人群中脂聯(lián)素的改變及其影響因素；2、脂聯(lián)素受體mRNA在Wistar大鼠體內(nèi)的分布；3、高脂飼養(yǎng)以及吡格列酮對(duì)大鼠脂肪組織脂聯(lián)素及其受體表達(dá)的影響；4、吡格列酮對(duì)不同濃度脂肪酸培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞脂聯(lián)素受體mRNA表達(dá)的影響。 方法:1、對(duì)年齡≥60歲的8

2、7例患者，按照WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)分為糖耐量正常(NGT)、糖耐量低減(IGT)和2型糖尿病(DM)三組，進(jìn)行體重、腰臀圍、血壓、血脂、氧化應(yīng)激指標(biāo)和脂聯(lián)素等的檢測(cè)，以所有檢測(cè)者脂聯(lián)素水平的中位數(shù)為界限將患者劃分為高、低脂聯(lián)素組，對(duì)上述各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行比較。 2、處死正常Wistar大鼠后迅速分離心肌、骨骼肌、肝臟、腎臟、睪丸和脂肪組織，分別提取等量組織的總RNA后進(jìn)行R1和R2的RT-PCR檢測(cè)。 3、將45只Wistar雄性大

3、鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、高脂飼養(yǎng)組和高脂+吡格列酮組，喂飼11周后，分離脂肪組織，提取總RNA后分別用RT-PCR和SouthernB1otting方法分析抵抗素、脂聯(lián)素和脂聯(lián)素受體表達(dá)的改變。 4、將HepG2細(xì)胞隨機(jī)均分為對(duì)照組、吡格列酮組、3組不同濃度飽和脂肪酸(PA)培養(yǎng)組和3組相應(yīng)濃度PA+吡格列酮(PA+P)處理組。培養(yǎng)24h后，提取總RNA，使用RT-PCR半定量分析R1和R2mRNA表達(dá)的改變。 結(jié)果:1、NG

4、T、IGT和DM三組間脂聯(lián)素水平逐步降低。與高脂聯(lián)素組相比較，低脂聯(lián)素組的NGT人數(shù)明顯減少，而DM人數(shù)明顯增加；同時(shí)血糖增高，高密度脂蛋白(HDL)水平降低(P＜0.01)。Logistic多元回歸分析顯示血糖和血脂為影響脂聯(lián)素水平變化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 2、在Wistar大鼠的心、肝、腎、骨骼肌、睪丸和脂肪組織中均檢測(cè)到了脂聯(lián)素受體1(R1)mRNA的表達(dá)，其中以脂肪和睪丸組織的表達(dá)量最高；脂聯(lián)素受體2(R2)mRNA主要表達(dá)

5、于肝臟，在腎臟和骨骼肌組織中也有少量表達(dá)。 3、高脂飼養(yǎng)組大鼠的體重、FBS、FFA、INS和HOMA-IR明顯高于對(duì)照組，糖耐量和胰島素耐量明顯下降；同時(shí)，高脂組脂肪組織的抵抗素、脂聯(lián)素的表達(dá)均明顯下降(P＜0.01)。與高脂組相比，高脂+吡格列酮組的胰島素水平和HOMA-IR明顯降低，差異顯著(P＜0.01)；脂聯(lián)素和抵抗素表達(dá)明顯增高，其中脂聯(lián)素的差異明顯(P＜0.05)。三組間R1mRNA的表達(dá)也表現(xiàn)出類(lèi)似趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)意義(P＞0.05)。 4、與對(duì)照組相比，PA組R2mRNA的表達(dá)下降，當(dāng)PA的濃度加至200μM以上時(shí)，R2mRNA表達(dá)的下降呈現(xiàn)明顯差異(P＜0.01)。在PA+P的各組中，R2mRNA的表達(dá)均較同PA濃度組增高，尤其是在PA濃度大于200μM時(shí)(P＜0.05或P＜0.01)。 結(jié)論:1、脂聯(lián)素水平的下降與老年糖尿病高危人群的糖耐量異常、肥胖、血脂異常和心血管疾病密切相關(guān)。綜合控制上述與脂聯(lián)素水平相關(guān)的指標(biāo)，很可能

7、延緩老年糖尿病高危人群糖尿病和心血管并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展。 2、R1在脂肪細(xì)胞的高表達(dá)以及R2在肝臟的高表達(dá)，確保了脂聯(lián)素可以準(zhǔn)確有效的通過(guò)不同的受體發(fā)揮其反饋調(diào)節(jié)或改善代謝的作用。 3、抵抗素、脂聯(lián)素的表達(dá)水平與肥胖、高脂血癥和胰島素抵抗的發(fā)生密切相關(guān)，其表達(dá)的上調(diào)是吡格列酮改善胰島素敏感性的重要途徑之一。R1水平的改變?cè)谝葝u素抵抗發(fā)生中的作用還有待進(jìn)一步研究。 3、R2很可能是胰島素增敏劑吡格列酮改善肝臟胰島素