中國野生菰米對胰島素抵抗的作用及其3種淀粉和植物化學(xué)物的分析測定.pdf

1、目的：（1）觀察中國菰米提取物對棕櫚酸誘導(dǎo)的HL-7702細(xì)胞急慢性損傷的保護(hù)作用，觀察中國菰米提取物對胰島素抵抗HepG2細(xì)胞模型的作用；
　　 （2）觀察中國菰米對高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠胰島素抵抗的作用，并觀察大鼠的血糖、血脂、胰島素、抵抗素等指標(biāo)的變化，以探討中國菰米改善胰島素抵抗的作用機(jī)制；
　　 （3）測定中國菰米的總淀粉、直鏈淀粉和抗性淀粉的含量，測定其總黃酮、皂甙和花色苷的含量，以探索中國菰米生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ)

2、。
　　 方法：（1）用棕櫚酸誘導(dǎo)HL-7702細(xì)胞發(fā)生急慢性損傷，MTT法檢測細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞凋亡，然后加入適當(dāng)濃度的菰米提取物，觀察其對細(xì)胞急慢性損傷的保護(hù)作用；用棕櫚酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞發(fā)生胰島素抵抗，用葡萄糖檢測試劑盒檢測細(xì)胞對葡萄糖的消耗量，然后加入適當(dāng)濃度的菰米提取物，觀察HepG2細(xì)胞的葡萄糖消耗量的變化。
　　 （2）40只SD雄性大鼠隨機(jī)分成高脂模型對照組、米面組、菰米組和陰性對照組，分別給

3、予高脂飼料、米面飼料、菰米飼料和基礎(chǔ)飼料，喂養(yǎng)6周。每周觀察大鼠基本情況并稱重，每2周尾靜脈采血測定大鼠空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（Ins）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），第6周末實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，股動(dòng)脈取血測定血清抵抗素（Res）濃度，頸椎脫臼處死大鼠，分離腎臟、腸系膜和睪丸周圍脂肪，稱重，計(jì)算脂體比。計(jì)算大鼠的胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR），并與其他指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 （3）采

4、用國標(biāo)法測定中國菰米總淀粉和直鏈淀粉含量，改良Goni法測定抗性淀粉含量；比色法等測定中國菰米總黃酮、皂甙和花色苷的含量。
　　 結(jié)果：（1）0.25mM、0.50mM、1.0mM濃度的棕櫚酸能引起HL-7702細(xì)胞生長抑制（急性損傷），100μ g/ml的菰米提取物能夠減輕該急性損傷作用；0.05mM的棕櫚酸能引起HL-7702細(xì)胞發(fā)生凋亡（慢性損傷），50μ g/ml的菰米提取物能夠減輕該慢性損傷作用。0.075mM的棕櫚酸

5、誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞發(fā)生胰島素抵抗，對葡萄糖的攝取利用能力下降，100μ g/ml的菰米提取物能夠使細(xì)胞對葡萄糖的攝取利用能力提高，改善其胰島素抵抗的程度。
　　 （2）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)過6周的飼養(yǎng)，與高脂模型對照組和米面組大鼠相比，菰米組大鼠的體重、空腹血糖、胰島素水平、胰島素抵抗指數(shù)、總膽固醇、甘油三酯、抵抗素水平、內(nèi)臟脂肪量和脂體比明顯下降，高密度脂蛋白膽固醇水平明顯升高。抵抗素與體重、總膽固醇、胰島素、胰島素抵抗指數(shù)以

6、及內(nèi)臟脂肪量成正相關(guān)，與高密度脂蛋白膽固醇呈負(fù)相關(guān)；HOMA-IR與體重、甘油三酯、抵抗素、內(nèi)臟脂肪量及脂體比成正相關(guān)，與高密度脂蛋白膽固醇呈負(fù)相關(guān)。
　　 （3）中國菰米的總淀粉含量為65.47g/100g，直鏈淀粉的含量為8.37％，抗性淀粉含量為11.73g/100g；中國菰米的總黃酮含量為0.352％，高于黃豆和玉米；其皂甙含量為0.254％，低于黃豆，但是高于玉米；花色苷含量為2.4g/100g。
　　 結(jié)論：

7、（1）不同濃度的棕櫚酸可以誘導(dǎo)HL-7702細(xì)胞急慢性毒性模型，而菰米提取物對棕櫚酸誘導(dǎo)的HL-7702細(xì)胞急慢性毒性有一定的保護(hù)作用；適當(dāng)濃度的菰米提取物對棕櫚酸誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞胰島素抵抗有保護(hù)作用，但是當(dāng)菰米提取物濃度過低時(shí)則未觀察到該保護(hù)作用，并且菰米提取物發(fā)揮細(xì)胞胰島素抵抗的保護(hù)作用可能不依賴于胰島素的存在。
　　 （2）菰米能改善高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠胰島素抵抗，可能是通過抑制大鼠的肥胖程度和體內(nèi)脂肪堆積、改善糖脂代謝