版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、機械刺激是軟骨組織工程中非常重要的調控因子。本文以軟骨細胞和骨髓間充質干細胞為種子細胞,研究了機械刺激在關節(jié)軟骨組織工程中的作用。
首先研究了機械刺激對牛膝關節(jié)不同軟骨細胞亞群在PRG4、HAS1、HAS2mRNA表達和PRG4、透明質酸蛋白質合成方面的影響。發(fā)現(xiàn)機械刺激可以誘導軟骨細胞亞群發(fā)生顯型的改變以適應其環(huán)境。軟骨細胞各個亞群之間的相互作用對透明質酸的合成有促進作用。使用混合亞群的軟骨細胞,在最佳的機械刺激條件和生
2、物化學條件下,可以誘導復合物表層的細胞重新分化具有淺表區(qū)細胞顯型,從而構建出較完整的關節(jié)軟骨層次結構和功能性的軟骨滑液界面。這對于通常以來自整個關節(jié)的各軟骨細胞亞群混合細胞作為種子細胞的組織工程有重要的意義。
由于軟骨細胞作為種子細胞存在來源不足,獲取手段復雜且對患者損傷較大的缺點,繼而研究了以hBMSCs為種子細胞,體外構建軟骨組織過程中機械刺激的作用。為了建立體外hBMSCs成軟骨細胞培養(yǎng)體系,研究了纖維蛋白凝膠——聚
3、氨酯支架體系是否支持體外hBMSCs向軟骨細胞的誘導分化。通過測量細胞的GAG/DNA值,以Real-timePCR測量細胞的mRNA水平,和組織學及免疫生物化學染色方法,對支架培養(yǎng)和微團培養(yǎng)進行了比較。實驗結果表明與微團培養(yǎng)體系相比,在最佳接種密度(5x106個細胞/支架)下,細胞支架復合物具有相似的軟骨細胞標志性蛋白合成量GAG/DNA,較高的軟骨細胞標志性基因COL2、AGGmRNA水平,和較低的成骨細胞標志性基因Sp7、ALP、
4、BSP2mRNA水平,同時還具有能夠為新生組織的積聚提供空間的優(yōu)點,有利于進一步使用生物力學的手段優(yōu)化體外干細胞向軟骨細胞的誘導分化。
在不同的外源TGF-β1濃度下,研究了機械刺激對hBMSCs分化過程的影響,并使用TGF-βⅠ型受體抑制劑LY364947阻斷TGF-β信號轉導通路,研究了TGF-β信號轉導通路在該過程中的作用。實驗結果表明機械刺激可以誘導纖維蛋白凝膠——聚氨酯支架培養(yǎng)的hBMSCs向軟骨細胞分化,前提條
5、件是外源TGF-β濃度較低且培養(yǎng)液中含有地塞米松。由于TGF-β本身可誘導hBMSCs成軟骨細胞,過高的外源TGF-β濃度下機械刺激的作用會被覆蓋。機械刺激通過TGF-β信號轉導通路誘導hBMSCs向軟骨細胞分化,TGF-β受體抑制劑可以阻斷TGF-β信號轉導通路從而抑制機械刺激誘導干細胞向軟骨細胞分化的作用。
對hBMSCs生物支架復合物施加不同強度和頻率的循環(huán)動壓力和表面剪切摩擦力,以觀察不同力學環(huán)境下hBMSCs的反
6、應.發(fā)現(xiàn)機械刺激的頻率和幅度可以調控hBMSCs向軟骨細胞分化的過程。在本文所采用的機械刺激范圍內,較高的機械刺激頻率和較高的動壓力幅度更有利于hBMSCs向軟骨細胞分化,更有利于抑制軟骨細胞肥大化。由此說明在以BMSCs為種子細胞的軟骨組織工程研究中,對細胞支架復合物施加適當強度的機械刺激非常重要。
將視黃酸β受體抑制劑LE135與機械刺激相結合,研究其對hBMSCs分化過程的影響。發(fā)現(xiàn)在微團培養(yǎng)和支架培養(yǎng)體系中,視黃酸
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 體外構建組織工程軟骨的實驗研究.pdf
- 在體構建組織工程軟骨的實驗研究.pdf
- 軟骨組織工程種子細胞應用策略及耳廓軟骨組織構建研究.pdf
- 體內構建組織工程化軟骨的實驗研究.pdf
- 組織工程軟骨的構建及修復關節(jié)軟骨缺損的實驗研究.pdf
- 組織工程方法構建預定形態(tài)軟骨.pdf
- 蠶絲負載軟骨細胞體外構建組織工程軟骨.pdf
- 體外軟骨組織工程研究.pdf
- 低溫凍存軟骨細胞構建組織工程化軟骨及組織工程化軟骨的低溫凍存.pdf
- 循環(huán)壓力對體外構建組織工程軟骨的影響.pdf
- 組織工程骨軟骨仿生設計與初步構建.pdf
- 轉瓶中組織工程骨軟骨復合物的動態(tài)構建.pdf
- 組織工程軟骨類型轉歸及人耳廊形態(tài)軟骨構建.pdf
- TGF-β1緩釋載體體外構建組織工程軟骨的研究.pdf
- 脂肪基質細胞向軟骨誘導分化及構建組織工程軟骨的實驗研究.pdf
- 體外構建組織工程學骨-軟骨復合組織修復兔關節(jié)軟骨缺損的研究.pdf
- 同種異體組織工程化軟骨的構建及其應用.pdf
- 共培養(yǎng)技術用于體外構建組織工程軟骨的實驗研究.pdf
- 脂肪干細胞體外構建組織工程軟骨的相關研究.pdf
- 軟骨細胞復合β-TCP生物陶瓷構建組織工程軟骨應用研究.pdf
評論
0/150
提交評論