2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、機械刺激是軟骨組織工程中非常重要的調控因子。本文以軟骨細胞和骨髓間充質干細胞為種子細胞,研究了機械刺激在關節(jié)軟骨組織工程中的作用。
   首先研究了機械刺激對牛膝關節(jié)不同軟骨細胞亞群在PRG4、HAS1、HAS2mRNA表達和PRG4、透明質酸蛋白質合成方面的影響。發(fā)現(xiàn)機械刺激可以誘導軟骨細胞亞群發(fā)生顯型的改變以適應其環(huán)境。軟骨細胞各個亞群之間的相互作用對透明質酸的合成有促進作用。使用混合亞群的軟骨細胞,在最佳的機械刺激條件和生

2、物化學條件下,可以誘導復合物表層的細胞重新分化具有淺表區(qū)細胞顯型,從而構建出較完整的關節(jié)軟骨層次結構和功能性的軟骨滑液界面。這對于通常以來自整個關節(jié)的各軟骨細胞亞群混合細胞作為種子細胞的組織工程有重要的意義。
   由于軟骨細胞作為種子細胞存在來源不足,獲取手段復雜且對患者損傷較大的缺點,繼而研究了以hBMSCs為種子細胞,體外構建軟骨組織過程中機械刺激的作用。為了建立體外hBMSCs成軟骨細胞培養(yǎng)體系,研究了纖維蛋白凝膠——聚

3、氨酯支架體系是否支持體外hBMSCs向軟骨細胞的誘導分化。通過測量細胞的GAG/DNA值,以Real-timePCR測量細胞的mRNA水平,和組織學及免疫生物化學染色方法,對支架培養(yǎng)和微團培養(yǎng)進行了比較。實驗結果表明與微團培養(yǎng)體系相比,在最佳接種密度(5x106個細胞/支架)下,細胞支架復合物具有相似的軟骨細胞標志性蛋白合成量GAG/DNA,較高的軟骨細胞標志性基因COL2、AGGmRNA水平,和較低的成骨細胞標志性基因Sp7、ALP、

4、BSP2mRNA水平,同時還具有能夠為新生組織的積聚提供空間的優(yōu)點,有利于進一步使用生物力學的手段優(yōu)化體外干細胞向軟骨細胞的誘導分化。
   在不同的外源TGF-β1濃度下,研究了機械刺激對hBMSCs分化過程的影響,并使用TGF-βⅠ型受體抑制劑LY364947阻斷TGF-β信號轉導通路,研究了TGF-β信號轉導通路在該過程中的作用。實驗結果表明機械刺激可以誘導纖維蛋白凝膠——聚氨酯支架培養(yǎng)的hBMSCs向軟骨細胞分化,前提條

5、件是外源TGF-β濃度較低且培養(yǎng)液中含有地塞米松。由于TGF-β本身可誘導hBMSCs成軟骨細胞,過高的外源TGF-β濃度下機械刺激的作用會被覆蓋。機械刺激通過TGF-β信號轉導通路誘導hBMSCs向軟骨細胞分化,TGF-β受體抑制劑可以阻斷TGF-β信號轉導通路從而抑制機械刺激誘導干細胞向軟骨細胞分化的作用。
   對hBMSCs生物支架復合物施加不同強度和頻率的循環(huán)動壓力和表面剪切摩擦力,以觀察不同力學環(huán)境下hBMSCs的反

6、應.發(fā)現(xiàn)機械刺激的頻率和幅度可以調控hBMSCs向軟骨細胞分化的過程。在本文所采用的機械刺激范圍內,較高的機械刺激頻率和較高的動壓力幅度更有利于hBMSCs向軟骨細胞分化,更有利于抑制軟骨細胞肥大化。由此說明在以BMSCs為種子細胞的軟骨組織工程研究中,對細胞支架復合物施加適當強度的機械刺激非常重要。
   將視黃酸β受體抑制劑LE135與機械刺激相結合,研究其對hBMSCs分化過程的影響。發(fā)現(xiàn)在微團培養(yǎng)和支架培養(yǎng)體系中,視黃酸

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