同種異體組織工程化軟骨的構建及其應用.pdf

1、第四軍醫(yī)大學博士學位論文同種異體組織工程化軟骨的構建及其應用姓名：孫安科申請學位級別：博士專業(yè)：耳鼻咽喉科學指導教師：陳文弦2001.5.1第四軍醫(yī)大學98媛博士論文●■●■■一I——一——————I●●—■●I在喉軟骨缺損修復和功能重建中應用的可行性及其效果為軟骨組織工程技術在耳鼻咽喉科的可能應用提供資料，奠定基礎。材料與方法同種異體預定形態(tài)組織工疆化軟骨的構曩取l周齡乳兔肋軟骨，剪切后用II型膠原酶消化分離獲得軟骨細胞，置舍20％胎

2、牛血清的HtmF12培養(yǎng)基在37℃、5％C02和飽和濕度條件下培養(yǎng)，收集傳第23代的軟臂細胞。調整濃度達s107，“，接種子塑為方形片狀和“C”形臂狀經(jīng)多聚賴氨酸處理的PGA三維支架材料上，將軟骨細胞PGA復合物體外培養(yǎng)710天然后種植于成年兔皮下分別于4周、8周和12周取材行大體和組織學觀察(加染色、Masson三色染色和阿麗辛藍過碘酸雪夫(AB／PAS)染色)，對工程化預定形態(tài)軟骨的構建情況進行評價在了解組織工程化軟量形成的同時。觀

3、察PGA的降解情況二、兩種異體緣織工程化軟膏修復曛軟骨缺損將種植于成年兔皮下的方型片狀同種異體軟骨細胞PGA支架材料復合物4周取材用于修復實驗15只雄性新西蘭大白兔(46月齡，體重25kg士0skg)，隨機分為實驗組(12只)和對照組(3只)，3％戊巴比妥按30rag／ks靜脈麻醉無膏條件下暴露甲狀軟臂在一側甲狀軟霄板上造成06cmx0，5cm的缺損區(qū)，內外軟骨膜一并去除，保留喉內粘膜然后植入同等大小組織工程化軟霄(實驗組)和單純PGA