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1、親和吸附劑具有選擇性高、成本低廉、制備簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),被廣泛用于于生物大分子的分離純化及環(huán)境治理。然而親和吸附劑配體篩選需經(jīng)大量吸附實(shí)驗(yàn),費(fèi)時(shí)費(fèi)力,限制了其進(jìn)一步的應(yīng)用。因此發(fā)展高效、快速的親和吸附劑配體篩選新方法在親和色譜的研究中具有重要意義。
在本課題組的前期工作中利用納米金(AuNPs)的光學(xué)性質(zhì),提出了一種簡(jiǎn)便、可視的親和吸附劑配體篩選方法:即將吸附目標(biāo)物修飾到納米金表面(GG8P-AuNPs),以含有吸附劑功能配體的
2、線型高分子為吸附劑模型,通過(guò)觀察AuNPs與聚合物混合后吸收波長(zhǎng)的變化程度判斷配體與吸附目標(biāo)物間的結(jié)合能力,從而實(shí)現(xiàn)親和吸附劑配體的篩選。
然而由于該體系中AuNPs憑借靜電斥力保持穩(wěn)定狀態(tài),因此其在高鹽及強(qiáng)酸/堿性條件下穩(wěn)定性欠佳;更重要的是其表面較強(qiáng)的負(fù)電荷背景對(duì)于陽(yáng)離子型配體篩選有著較大干擾,限制了其應(yīng)用范圍。本文針對(duì)以上問(wèn)題,以聚乙二醇(PEG)為空間穩(wěn)定劑,制備目標(biāo)肽-PEG-AuNPs(GG8P-PEG-AuN
3、Ps),并將其用于親和吸附劑配體篩選;著重考察了GG8P-PEG-AuNPs在高鹽、強(qiáng)酸及強(qiáng)堿條件下的穩(wěn)定性及其對(duì)陽(yáng)離子型配體的篩選準(zhǔn)確性。結(jié)果顯示:GG8P-PEG-AuNPs在高鹽(CNaCl<3M)、強(qiáng)酸及強(qiáng)堿(pH1~13)條件下具有良好的穩(wěn)定性;此外,與靜電穩(wěn)定的GG8P-AuNPs相比,GG8P-PEG-AuNPs可以很好的篩選具有不同結(jié)構(gòu)的陽(yáng)離子配體,其篩選結(jié)果表明具有季銨鹽結(jié)構(gòu)的DMC配體與GG8P的結(jié)合能力明顯高于具有
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