阿特拉津免疫檢測方法的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本論文對除草劑阿特拉津殘留的直接競爭酶聯(lián)免疫檢測方法(ELISA)和膠體金免疫層析試紙條檢測法進行了系統(tǒng)的研究。
  成功制備了半抗原,采用活化酯法將半抗原分別與牛血清蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)和辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)制備免疫原、包被抗原和酶標抗原,免疫原免疫大耳白兔以后,成功獲得了特異性抗阿特拉津的多克隆抗體。
  建立了阿特拉津直接競爭ELISA方法,方法的半抑制濃度IC50為0.12ngmL-1,方法的

2、最低檢出限(LOD,以IC15計算)為0.01ngmL-1。11種結(jié)構(gòu)類似的三嗪類除草劑中,抗體與撲滅津(96.53%)、撲草凈(76.57%)和莠滅津(28.02%)的交叉反應(yīng)較大,與其他除草劑的交叉反應(yīng)率均小于20%。選擇純凈水、自來水、井水、海河水、土壤和玉米作為樣品進行了阿特拉津的添加回收實驗,阿特拉津的回收率在76.5-108.1%之間,板內(nèi)變異系數(shù)為3.2-8.2%,板間變異系數(shù)為5.2-9.6%,該檢測結(jié)果與高效液相色譜分

3、析法(HPLC)的檢測結(jié)果有很好的相關(guān)性,兩種方法檢測結(jié)果的線性回歸方程為y=1.004x-0.049,相關(guān)系數(shù)r2為0.991。以上結(jié)果表明本研究建立的ELISA方法具有很高的準確度和精確度,適用于快速檢測水、土壤和玉米樣品中阿特拉津的殘留,并且可以實現(xiàn)大量樣品的同時檢測。
  同時,以膠體金作為抗體標記物,建立了免疫層析試紙條快速檢測方法,該方法的檢出限定義為使試紙條檢測線(T線)的條帶顏色與質(zhì)控線(C線)相比產(chǎn)生明顯區(qū)別的阿

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