阿特拉津免疫檢測方法的研究.pdf

1、本論文對(duì)除草劑阿特拉津殘留的直接競爭酶聯(lián)免疫檢測方法(ELISA)和膠體金免疫層析試紙條檢測法進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。
　　成功制備了半抗原，采用活化酯法將半抗原分別與牛血清蛋白(BSA)、卵清白蛋白（OVA）和辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)制備免疫原、包被抗原和酶標(biāo)抗原，免疫原免疫大耳白兔以后，成功獲得了特異性抗阿特拉津的多克隆抗體。
　　建立了阿特拉津直接競爭ELISA方法，方法的半抑制濃度IC50為0.12ngmL-1，方法的

2、最低檢出限(LOD，以IC15計(jì)算)為0.01ngmL-1。11種結(jié)構(gòu)類似的三嗪類除草劑中，抗體與撲滅津(96.53％)、撲草凈(76.57％)和莠滅津(28.02％)的交叉反應(yīng)較大，與其他除草劑的交叉反應(yīng)率均小于20％。選擇純凈水、自來水、井水、海河水、土壤和玉米作為樣品進(jìn)行了阿特拉津的添加回收實(shí)驗(yàn)，阿特拉津的回收率在76.5-108.1％之間，板內(nèi)變異系數(shù)為3.2-8.2％，板間變異系數(shù)為5.2-9.6％，該檢測結(jié)果與高效液相色譜分

3、析法(HPLC)的檢測結(jié)果有很好的相關(guān)性，兩種方法檢測結(jié)果的線性回歸方程為y=1.004x-0.049，相關(guān)系數(shù)r2為0.991。以上結(jié)果表明本研究建立的ELISA方法具有很高的準(zhǔn)確度和精確度，適用于快速檢測水、土壤和玉米樣品中阿特拉津的殘留，并且可以實(shí)現(xiàn)大量樣品的同時(shí)檢測。
　　同時(shí)，以膠體金作為抗體標(biāo)記物，建立了免疫層析試紙條快速檢測方法，該方法的檢出限定義為使試紙條檢測線（T線）的條帶顏色與質(zhì)控線（C線）相比產(chǎn)生明顯區(qū)別的阿