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1、本文主要研究了海帶多糖轉(zhuǎn)化生產(chǎn)燃料乙醇的關(guān)鍵技術(shù)。從海洋環(huán)境中篩選具有海帶多糖降解酶活性的微生物,應(yīng)用于海帶發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的水解預(yù)處理,研究了海帶發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的水解條件優(yōu)化、分批補(bǔ)料發(fā)酵等。主要內(nèi)容如下:
從腐爛的褐藻中篩選一株海藻多糖降解菌,編號(hào)L206,通過(guò)形態(tài)觀察、生化單因子試驗(yàn)及16S rRNA分子鑒定,DNS法測(cè)定海藻多糖降解酶活性等。結(jié)果表明,菌株L206為白色噬瓊膠菌(Agarivorans albus),屬革蘭氏
2、陰性短桿菌,生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期為3~21 h,適宜生長(zhǎng)的NaCl質(zhì)量濃度為0%~3%(w/v);L206被海帶粉誘導(dǎo)至72 h時(shí),綜合復(fù)合酶活力達(dá)到最大,其中淀粉酶活力最高(28.17 U/mL),木聚糖酶其次(23.83 U/mL)。
采用酸—市售酶—海藻多糖水解酶等工藝逐級(jí)水解海帶,并用水解液發(fā)酵生產(chǎn)乙醇。結(jié)果表明,海帶用0.4 N HCl、3%纖維素酶、0.3%淀粉酶及白色噬瓊膠菌產(chǎn)生的海藻多糖降解酶逐級(jí)水解,水解液再經(jīng)12%釀
3、酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae BCRC21686、BCRC21687、BCRC22220)(濃度各4%)發(fā)酵7 d,海帶生產(chǎn)乙醇的最大濃度可達(dá)1.1%(v/v)(3 d),最大乙醇產(chǎn)率為17.56 g/100 g。
進(jìn)一步對(duì)酸水解工藝進(jìn)行改進(jìn),采用0.1 N檸檬酸、0.1 N草酸、0.4 N鹽酸、0.6 N硫酸水解海帶,水解液再用3%纖維素酶、0.3%淀粉酶及白色噬瓊膠菌產(chǎn)生的海藻多糖降解酶逐級(jí)水
4、解,發(fā)酵菌改為12%耐鹽釀酒酵母菌(S.cerevisiae BCRC21824)發(fā)酵6d。結(jié)果表明:海帶發(fā)酵4 d,1%草酸水解工藝的乙醇產(chǎn)率(25.56 g/100 g)略高于0.4 N鹽酸工藝(24.59 g/100 g)。
采用0.1 N草酸、3%纖維素酶、0.3%淀粉酶及白色噬瓊膠菌產(chǎn)生的海藻多糖降解酶逐級(jí)水解,發(fā)酵菌改為24%釀酒酵母菌(S. cerevisiae BCRC21824)發(fā)酵3 d,開(kāi)始分批補(bǔ)料,每天
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