S-腺苷-L-甲硫氨酸的分離純化及其硫酸鹽制備的研究.pdf

1、S-腺苷-L-甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine，簡(jiǎn)稱SAM，SAMe或AdoMet)是一種重要的中間代謝產(chǎn)物，廣泛存在于各種生物體中，也是人體內(nèi)一種重要的生理活性物質(zhì)。本文主要研究了破碎細(xì)胞抽提SAM的方法;SAM的分離純化;SAM硫酸鹽的制備;SAM硫酸鹽的穩(wěn)定性。
　　對(duì)破碎細(xì)胞抽提SAM的方法進(jìn)行研究表明，采用甲酸進(jìn)行破碎抽提效果最好，優(yōu)化得出最佳破碎提取條件:甲酸濃度:0.5mol/L，甲酸用量:1

2、.25BV發(fā)酵液體積，破碎時(shí)間:90min。SAM提取率以高氯酸的破碎率為1，能達(dá)到95％以上。
　　采用離子交換法從細(xì)胞提取液中分離純化SAM。此法相對(duì)于傳統(tǒng)的使用苦味酸，苦酮酸選擇沉淀SAM的方法，提高了SAM的回收率，而且減小了操作的危險(xiǎn)性和對(duì)環(huán)境的污染。研究得出SAM提取液在D113弱酸性陽離子交換樹脂上的SAM最佳上柱初始pH值為5.0。以硫酸作為洗脫劑洗脫SAM，得出最佳洗脫條件為0.2mol/L的硫酸，流速2BV/h

3、。SAM洗脫效率為90.3％。
　　采用有機(jī)反相沉淀的方法制備SAM硫酸鹽，優(yōu)化SAM硫酸鹽的結(jié)晶工藝。通過實(shí)驗(yàn)得到，選用80％甲醇濃度比例，甲醇用量5BV進(jìn)行結(jié)晶，該條件下結(jié)晶狀況最好。SAM硫酸鹽回收率達(dá)到70％以上，產(chǎn)品純度達(dá)到91.05％。
　　SAM硫酸鹽的穩(wěn)定性仍受pH和溫度的影響。但溫度對(duì)SAM硫酸鹽的穩(wěn)定性影響較大，隨溫度升高，降解速率明顯加快，損失量顯著增加。因此，SAM硫酸鹽的保存應(yīng)在低溫(0℃)下保存。