壓電生物芯片在艾滋病病毒核酸分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、壓電生物傳感器是利用壓電材料—石英晶體作為換能器，將檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)的傳感器?；蛐酒址QDNA微探針陣列(microarray)，是一種重要的生物芯片。這種生物芯片是通過在微小的基片表面固定大量的分子識(shí)別探針，或構(gòu)建微分析單元和系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)化合物、蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞或其它生物組分準(zhǔn)確、快速、大信息量的篩選或檢測(cè)。論文主要研究了壓電生物芯片(基因芯片)在1型人類免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸分析中的應(yīng)用。 論文對(duì)單鏈DNA

2、探針在液相條件下的固定液體系進(jìn)行了優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。確定了pH在8.1左右和離子強(qiáng)度在0.016的條件下，實(shí)驗(yàn)所使用寡核苷酸探針能在水性溶液中獲得比較滿意的固定結(jié)果。同時(shí)，對(duì)DNA探針在電極表面的固定時(shí)間、雜交液體系、雜交時(shí)間等反應(yīng)條件也進(jìn)行了研究，構(gòu)建了壓電型HIV-1生物芯片。 論文利用分子自組裝技術(shù)，將巰基修飾的寡核苷酸探針固定在電極上，再利用核酸的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，實(shí)現(xiàn)同源核酸的特異性結(jié)合(雜交)，然后應(yīng)用壓電生物芯片實(shí)時(shí)分析儀

3、AGA2002對(duì)HIV-1的核酸進(jìn)行了分析研究。作為臨床檢測(cè)應(yīng)用的初期階段，我們對(duì)1型人類免疫缺陷病毒(HIV-1)的核酸(RNA)進(jìn)行了基因檢測(cè)。 對(duì)人類免疫缺陷病毒，我們應(yīng)用AGA2002，在避開PCR擴(kuò)增反應(yīng)過程的情況下，直接將分離，純化處理后得到的核酸進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，進(jìn)行盲法實(shí)驗(yàn)，然后將實(shí)驗(yàn)結(jié)果與Bayer公司生產(chǎn)的HIV-13.0型bDNA儀的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)照，結(jié)果表明：檢測(cè)結(jié)果的陰、陽性符合較好；陰性符合率100％

4、，陽性符合率在94.9％，用HBV和健康的正常人血樣進(jìn)行特異性實(shí)驗(yàn)研究也表明，所進(jìn)行的檢測(cè)具有比較滿意的特異性，完全能用于HIV-1的定性檢測(cè)。 論文還對(duì)未經(jīng)過擴(kuò)增的雜交反應(yīng)動(dòng)力學(xué)過程進(jìn)行了研究，在準(zhǔn)一級(jí)反應(yīng)條件下推導(dǎo)出兩種響應(yīng)模型，不但成功地應(yīng)用于臨床檢測(cè)，而且可用于雜交動(dòng)力學(xué)及熱力學(xué)的研究。其中還利用平衡法模型對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了分析，得到了半定量的分析結(jié)果，對(duì)于進(jìn)一步的研究開發(fā)和定量分析提供了理論模型。 論文最后討論了