右旋磷霉素微生物手性轉(zhuǎn)化可行性研究.pdf

1、本論文研究的目的物左旋磷霉素(簡稱磷霉素，(+)FOM)作為一種新型抗生素，雖然發(fā)現(xiàn)時間不長，但應(yīng)用范圍卻日益廣泛。目前，磷霉素的工業(yè)生產(chǎn)主要是應(yīng)用化學(xué)合成方法，但該方法存在原材料浪費、環(huán)境污染和成本較高等一系列問題。因此開發(fā)新的合成途徑勢在必行。利用微生物進行手性生物轉(zhuǎn)化具有立體選擇性高、副產(chǎn)物少、反應(yīng)條件溫和及環(huán)境友好等優(yōu)點，因而探索通過生物轉(zhuǎn)化方法將右旋磷霉素((+)FOM)轉(zhuǎn)化為左旋磷霉素的可行性，是很有必要的。
　　東北

2、制藥集團股份有限公司有較長的磷霉素生產(chǎn)歷史，其長期堆放廢棄右旋磷霉素的庫房附近的土壤中，可能含有符合我們要求的轉(zhuǎn)化菌株，即具有右旋磷霉素轉(zhuǎn)化能力的菌株。
　　基于此設(shè)想，本論文探索采用“底物利用與產(chǎn)物耐受復(fù)合篩選模型”，在土壤細(xì)菌懸液中分別篩選、富集以右旋磷霉素為唯一碳源的混合菌體以及抗左旋磷霉素的混合菌體，兩類細(xì)菌混合后再經(jīng)兩種轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基培養(yǎng)以實現(xiàn)右旋磷霉素至左旋磷霉素的手性生物轉(zhuǎn)化。通過左旋磷霉素敏感菌生物檢測，土樣B和E的兩

3、種轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基的發(fā)酵液均能產(chǎn)生抑菌圈，再通過薄層層析(TLC)法對這兩種土樣的發(fā)酵液與左旋磷霉素標(biāo)準(zhǔn)品做層析比對，得到了相同的比移值，可以初步認(rèn)定發(fā)酵液中有左旋磷霉素產(chǎn)生，從而證明了右旋磷霉素至左旋磷霉素生物催化途徑的真實存在。
　　在本研究中，土樣B的混合菌體經(jīng)轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基Ⅰ培養(yǎng)后得到的發(fā)酵液能夠產(chǎn)生最大的抑菌圈，抑菌圈直徑為2.23cm，根據(jù)左旋磷霉素標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)生的抑菌圈直徑與左旋磷霉素濃度的對數(shù)值之比，計算該發(fā)酵液中的左旋磷霉素含