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文檔簡介
1、牛奶中的抗生素殘留是關(guān)系人民安全的公共衛(wèi)生事件,目前各國都高度關(guān)注牛奶中抗生素殘留的危害性,對其實施檢測和監(jiān)控具有重要的現(xiàn)實意義?;诒砻娴入x子體共振(surface plasmon resonance,SPR)檢測技術(shù)具有測量時間短,無需標(biāo)記,檢測精度高等優(yōu)點。因此,本課題對基于SPR測量牛奶中抗生素殘留的方法進行了深入系統(tǒng)地研究。主要工作如下:
分析了微型SPR在測量抗生素測量的最佳條件。本實驗通過研究重建方法,液體流
2、速、試劑的濃度等因素對實驗結(jié)果的影響,根據(jù)實驗結(jié)果制定一套最佳的實驗測量條件和標(biāo)準(zhǔn)測量的具體步驟。以氨芐青霉素為例,研究不同試劑、流速等對測量的影響,制定了相應(yīng)的流程給出最佳的測量條件,提高了測量精度和穩(wěn)定性。如流速在10μl/min的流速,重建溶液以70mM的NaOH最佳的實驗條件等。完成了基于SPR抗生素測量的最佳實驗條件研究。
研究了基于SPR的牛奶抗生素殘留的直接測量法、間接測量法。采用表面等離子體共振的生物光學(xué)傳
3、感器的方法,利用生物分子相互作用分析原理及傳感器對折射率的高度敏感性,結(jié)合傳感器金膜表面綁定抗氨芐青霉素單克隆抗體的技術(shù),實現(xiàn)了牛奶中氨芐青霉素含量的定量檢測。實驗中利用微型表面等離子體共振傳感器構(gòu)建了測量系統(tǒng),介紹了傳感器表面的處理方法,并對氨芐青霉素濃度為0ng/mL,10ng/mL,50ng/mL,100ng/mL的牛奶樣品進行了測量,通過對測量結(jié)果進行分析,得到了不同氨芐青霉素濃度的傳感器響應(yīng)圖,結(jié)果表明,基于表面等離子體共振的
4、光學(xué)生物傳感器在牛奶抗生素藥物殘留檢測方面具有很好的應(yīng)用前景,這兩種方法都能夠簡單快速地對樣品進行測量,克服了傳統(tǒng)方法的缺點。直接測量法測量牛奶中氨芐青霉素的最低檢測限達到33.6mg/dL,間接測量法對于氨芐青霉素的最低檢測限達到50ng/mL。
利用微型表面等離子體共振的生物傳感器測量了殘留在牛奶中的氨芐青霉素的濃度。采用競爭抑制試驗的方法,即先將定量的單克隆抗氨芐青霉素抗體(3H295)和含氨芐青霉素的牛奶樣品混合,
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