新型載藥微泡的制備及體內(nèi)初步實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分，包裹紫杉醇的高分子納米粒與脂質(zhì)微泡復(fù)合體的制備研究
　　目的：利用生物素-親和素技術(shù)制備一種包裹紫杉醇的新型載藥微泡，并對其連接效果、理化性質(zhì)進(jìn)行檢測。
　　方法：采用單乳化法制備包裹紫杉醇的PLGA-COOH納米粒(Pac-PLGA)，檢測其包封率與載藥量，采用碳二亞胺共價(jià)連接法將其與鏈霉親和素相連，免疫熒光檢測鏈霉親和素與Pac-PLGA的連接情況。采用機(jī)械振蕩法制備生物素化的脂質(zhì)微泡(BIO-MB)及普通脂質(zhì)

2、微泡(MB)。連接分為2組：生物素.親和素組(SA-Pac-PLGA+BIO-MB)，對照組(Pac-PLGA+MB)。用激光共聚焦顯微鏡分別觀察2組在不同時(shí)間點(diǎn)脂質(zhì)微泡與Pac-PLGA的連接情況。
　　結(jié)果：Pac-PLGA的平均粒徑為(131.1±29.7)nm，掃描電鏡觀察呈球形，大小均勻，分散度好。高效液相色譜法測得PLGA納米粒對紫杉醇的包封率為(85±2.1)％，載藥量為(4.25±0.16)％，熒光檢測鏈霉親和素成

3、功地與Pac-PLGA連接。激光共聚焦觀察生物素-親和素組Pac-PLGA較多地連接在BIO-MB的表面。而對照組MB表面未見Pac-PLGA的聚集。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)成功地制備出包裹紫杉醇的新型載藥微泡，有望為惡性腫瘤的治療提供一種理想的藥物載體和靶向給藥系統(tǒng)。
　　第二部分，包裹紫杉醇的高分子納米粒與脂質(zhì)微泡復(fù)合體在小鼠肝臟的定位釋放研究
　　目的：探討新型載藥微泡在一定聲強(qiáng)的超聲定位輻照下，紫杉醇及PLGA納米粒

4、在小鼠肝臟的定位釋放情況。
　　方法：利用生物素-親和素技術(shù)制備包裹紫杉醇的新型載藥微泡。將實(shí)驗(yàn)小鼠分為3組：載紫杉醇PLGA納米粒組(Pac-PLGA納米粒組)、載紫杉醇PLGA納米粒與超聲脂質(zhì)微泡混合組(混合組)、包裹紫杉醇的新型載藥微泡組，經(jīng)尾靜脈注入小鼠體內(nèi)后，3組小鼠均用相同聲強(qiáng)的超聲經(jīng)體表定點(diǎn)輻照小鼠肝臟1 min，于處理1 h后斷頸處死取肝組織，用高效液相色譜法測定小鼠肝臟組織中紫杉醇的濃度，用激光共聚焦顯微鏡觀察小

5、鼠肝組織切片每高倍視野下(x400)熒光標(biāo)記的Pac-PLGA納米粒的數(shù)量。
　　結(jié)果：高效液相色譜法測得新型載藥微泡組小鼠肝組織中的紫杉醇含量為(5.335±1.087)ug/g，高于混合組(4.067±0.954)ug/g和Pac-PLGA納米粒組(2.908±0.925)ug/g，p均<0.01，且混合組高于Pac-PLGA納米粒組(p<0.01)。激光共聚焦觀察每高倍視野下(x400)熒光標(biāo)記的Pac-PLGA納米粒的數(shù)量

6、，Pac-PLGA納米粒組數(shù)量為(17.590±5.811)個(gè)，混合組數(shù)量為(31.227±7.177)個(gè)，新型載藥微泡組數(shù)量為(47.500±7.301)個(gè)，新型載藥微泡組Pac-PLGA納米粒數(shù)量高于其余各組(p<0.01)，且混合組高于Pac-PLGA納米粒組(p<0.01)。
　　結(jié)論：新型載藥微泡組小鼠肝組織中的紫杉醇含量及PLGA納米粒的數(shù)量明顯高于其余各組。新型載藥微泡能夠提高靶組織區(qū)內(nèi)的藥物濃度及PLGA納米粒的數(shù)