羊毛TGASE酶法接枝改性機理研究.pdf

1、轉谷氨酰胺酶(Transglutaminase,簡稱TG)是一類可催化蛋白質內賴氨酸殘基上的ε-氨基和谷氨酰胺殘基上的γ-羥酰胺基胺基間結合的聚合性酶,使蛋白質內部形成交聯(lián)。羊毛蛋白中含有相對豐富的賴氨酸和谷氨酰胺,因此利用轉谷氨酰胺酶可催化其內部形成共價交聯(lián),進而對羊毛接枝改性,從而改善羊毛的物理和化學性能。傳統(tǒng)的羊毛改性常常使用氯化劑及其衍生物,但氯化過程所產生的AOX會造成嚴重的環(huán)境污染,因此受到嚴格的限制。
　　 本課題

2、,首先采用靛酚藍分光光度法來測定MTG酶催化反應體系所釋放的氨,研究發(fā)現(xiàn),Tris-HCl緩沖液中靛酚藍顯色法測氨不可行,而磷酸鹽緩沖液對其影響不大。通過測定MTG酶催化羊毛織物交聯(lián)反應釋放氨量與羊毛織物強力和白度的對比發(fā)現(xiàn),MTG酶催化交聯(lián)的經過KMnO4和DCCA預處理的羊毛織物,其強力分別恢復了6％和40％,DCCA預處理的羊毛織物其白度恢復了2％左右。而其反應體系釋氨量卻無法檢測到,說明MTG酶催化羊毛織物交聯(lián)釋放氨較少,不易檢

3、測。通過對羊毛蛋白模擬物--酪蛋白的MTG酶交聯(lián)釋放氨的檢測,發(fā)現(xiàn)10g/L酶濃度下,反應體系釋氨量在7.5μg/ml,證實了MTG酶對酪蛋白的催化交聯(lián)作用,最后采用自制的羊毛蛋白溶液通過對其MTG酶催化交聯(lián)釋氨的檢測,16g/L酶濃度下,反應體系釋氨量在2.5μg/ml,證明了MTG酶對羊毛蛋白溶液的交聯(lián)作用。研究發(fā)現(xiàn),還原劑DTT的加入能改變羊毛的蛋白質結構,反應體系中20mmol/L的DTT能促進MTG酶對羊毛的催化交聯(lián)作用。最后