山核桃中類(lèi)脂褐素測(cè)定方法及環(huán)境對(duì)其積累的影響研究.pdf

1、類(lèi)脂褐素(Lipofuscin-like pigments，LFLP)是細(xì)胞胞漿內(nèi)的一種棕黃色脂類(lèi)顆粒，是由膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物與細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸和磷脂交聯(lián)形成的一種帶Schiff堿基的熒光性化合物。未加工的山核桃雖具有自身抗氧化活性物質(zhì)、保護(hù)酶類(lèi)等延緩脂肪的氧化，但其水分和不飽和脂肪酸含量較加工成品高，故貯藏過(guò)程中更易發(fā)生脂肪氧化，使山核桃核仁不僅出現(xiàn)異味，而且會(huì)產(chǎn)生對(duì)人體有害的物質(zhì)，大大降低了山核桃的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和商品價(jià)值。目前，關(guān)于山核

2、桃中類(lèi)脂褐素的研究還未見(jiàn)報(bào)道，本文以山核桃為試驗(yàn)材料，研究了其類(lèi)脂褐素的提取及測(cè)定方法;研究了貯藏時(shí)間、溫度、氣體環(huán)境和光照對(duì)山核桃中類(lèi)脂褐素積累的影響;并研究類(lèi)脂褐素在積累過(guò)程中與山核桃品質(zhì)劣變、膜脂氧化以及酚類(lèi)褐變的關(guān)系，進(jìn)而明確類(lèi)脂褐素在山核桃貯藏過(guò)程中的積累機(jī)制，這對(duì)進(jìn)一步明確類(lèi)脂褐素積累與植物衰老間的關(guān)系具有重要的意義。研究結(jié)果分述如下:
　　 (1)對(duì)山核桃類(lèi)脂褐素的提取方法進(jìn)行了研究，摸索了山核桃類(lèi)脂褐素的特征熒光

3、光譜，確定了山核桃類(lèi)脂褐素測(cè)定的最佳前處理方法，在此基礎(chǔ)上通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，研究了提取方式、提取溫度、提取時(shí)間以及提取溶劑pH對(duì)類(lèi)脂褐素提取率的影響。結(jié)果表明采取乙醚進(jìn)行除油前處理和氯仿∶甲醇∶磷酸緩沖溶液(2∶1∶1)的提取溶劑，提取時(shí)間為2.0h，提取溫度50℃，提取液pH為6.0時(shí)山核桃類(lèi)脂褐素的提取效率最高。
　　 (2)溫度、氣體環(huán)境和光照是影響山核桃類(lèi)脂褐素積累的三個(gè)重要環(huán)境因素。山核桃的類(lèi)脂褐素在不同溫度下

4、的貯藏過(guò)程中均呈一定的上升趨勢(shì)，但低溫可以顯著的抑制類(lèi)脂褐素含量的上升，而高溫可以加速其含量的積累。在貯藏期間，氧氣處理山核桃的類(lèi)脂褐素含量始終顯著高于其他兩種無(wú)氧處理。并且高溫，高氧的環(huán)境更有利于類(lèi)脂褐素的生成。光照處理的類(lèi)脂褐素相對(duì)含量總體上高于避光處理組，說(shuō)明暴露在日光燈下能引起山核桃仁中類(lèi)脂褐素的光氧化現(xiàn)象。但是光照處理的山核桃中類(lèi)脂褐素都在貯藏后期出現(xiàn)的不同程度下降。由統(tǒng)計(jì)分析可知，在整個(gè)貯藏過(guò)程中溫度對(duì)類(lèi)脂褐素積累的影響總是

5、比氣體環(huán)境大。在貯藏初期溫度對(duì)類(lèi)脂褐素的影響大于光照，而在貯藏后期光照條件變成了影響類(lèi)脂褐素累積更為重要的因素。
　　 (3)低溫、真空或氮?dú)猸h(huán)境和避光貯藏均能抑制山核桃過(guò)氧化值、茴香胺值的上升，減少膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量的上升和O2·-的積累，降低細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞程度，減慢山核桃中多酚含量的降低和褐變度的增大，從而延緩山核桃采后貯藏過(guò)程中的衰老進(jìn)程。氧氣處理的山核桃過(guò)氧化值、茴香胺值以及MDA含量和O2-生成速率從貯藏初期開(kāi)始

6、就迅速升高并且上升速度不斷加快。電子鼻試驗(yàn)結(jié)果與山核桃指標(biāo)測(cè)定的結(jié)果相一致。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，40℃貯藏期間山核桃總過(guò)氧化值與類(lèi)脂褐素含量增加呈極顯著相關(guān)（相關(guān)系數(shù)分別達(dá)到0.98**），表明類(lèi)脂褐素與脂肪氧化密切相關(guān)。證實(shí)脂肪的氧化產(chǎn)物的確參與了類(lèi)脂褐素的積累;山核桃MDA、超氧陰離子與類(lèi)脂褐素含量增加呈極顯著相關(guān)（相關(guān)系數(shù)分別達(dá)到0.92**和0.93**），表明類(lèi)脂褐素與膜脂過(guò)氧化和活性氧代謝密切相關(guān);此外，類(lèi)脂褐素含量與多酚含量