植物乳桿菌ZJ317產(chǎn)細(xì)菌素的初步研究.pdf

1、乳酸菌是一種在食品發(fā)酵工業(yè)中應(yīng)用廣泛的益生菌。1928年，首次報(bào)道了乳酸菌的代謝產(chǎn)物有抑菌作用，接著證明了這種物質(zhì)是細(xì)菌素，1969年，F(xiàn)AO/WHO確認(rèn)乳酸菌素Nisin為安全、高效、可靠的食品防腐劑。近年來，由于食品病原菌和人工合成防腐劑危害的加劇，人們開始尋找天然安全的防腐劑代替，乳酸菌素以其良好的抑菌性和安全性而受到了越來越多的關(guān)注，同時(shí)，由于乳酸菌素具有高效、無毒、無殘留、無抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，也被認(rèn)為是抗生素的最有效的替代物。

2、 本實(shí)驗(yàn)室從兒童糞便中篩選出一株具有抑菌活性的乳酸菌，本實(shí)驗(yàn)對其進(jìn)行了初步的研究，主要內(nèi)容包括：(1)通過形態(tài)學(xué)觀察，生理生化特征分析和16S rRNA進(jìn)化分析對該菌株進(jìn)行了鑒定，發(fā)現(xiàn)該菌是一株植物乳桿菌屬菌種，暫時(shí)將其命名為植物乳桿菌ZJ317(L.plantarumZJ317)，相應(yīng)地其所產(chǎn)細(xì)菌素命名為植物乳桿菌素ZJ317(plantaricinZJ317)。plantaricin ZJ317在酸性條件下活性最強(qiáng)，穩(wěn)定性也最高

3、。當(dāng)pH值超過4.5即失去活性。耐熱，121℃處理30min仍能保留70％的活性。對蛋白酶K和胰蛋白酶敏感，分子量約為4kDa。(2)plantaricin ZJ317屬于廣譜性細(xì)菌素，抑菌譜包括大部分革蘭氏陰性菌和部分革蘭氏陽性菌，如惡臭假單胞菌、枯草芽孢桿菌、單增李斯特氏菌、福氏志賀氏菌、檸檬色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏菌等，但對其自身生長不具備抑制作用。(3)利用同源引物克隆到乳酸菌中多個(gè)與已知細(xì)菌素表達(dá)相關(guān)的基因，其中有一條新的

4、基因，含有長約129bp的ORF。是plantaricin ZJ317的疑似基因。(4)改變培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件能大幅提高plantaricin ZJ317的活性。酵母提取物、蔗糖較為有利于L.plantarum ZJ317生產(chǎn)plantaricin ZJ317。培養(yǎng)基組成為酵母提取物10 g/L、蛋白胨10 g/L、檸檬酸三銨2 g/L、蔗糖10 g/L、葡萄糖10 g/L、磷酸氫二鉀4 g/L、吐溫80 l mL/L、培養(yǎng)初始pH為6.