牛奶中兩種磺胺類藥物殘留量的同時(shí)測(cè)定（HPLC法）及其消除規(guī)律的研究.pdf

1、本研究采用固相萃取法提純凈化，高效液相色譜法分離和紫外檢測(cè)器檢測(cè)，對(duì)牛奶中的磺胺嘧啶(SD)和磺胺問(wèn)甲氧嘧啶(SMM)的殘留檢測(cè)進(jìn)行了研究，旨在建立一種能對(duì)牛奶中SD和SMM殘留進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，并通過(guò)這種方法研究牛奶中兩種磺胺類藥物的消除規(guī)律，確立合理的休藥期。 經(jīng)實(shí)驗(yàn)對(duì)比，確立同時(shí)檢測(cè)牛奶中SD和SMM的樣品前處理方法為：精密量取10ml待測(cè)奶樣，置于50ml聚丙烯離心管中，加入無(wú)水硫酸鈉4g和乙腈25ml，渦動(dòng)混合

2、15s，中速振蕩20min，2500r/min離心5min。上清液移至分液漏斗中，加入30ml正己烷，振搖2min后，靜止5min，分離乙腈層。用25ml乙腈將沉淀物重復(fù)提取1次，乙腈層經(jīng)同一份正己烷分配，合并乙腈層于100ml雞心瓶中，加入正丙醇5ml，50℃減壓濃縮至近干。用3ml乙腈-水(95：5)溶解殘留物過(guò)堿性氧化鋁SPE柱，不收集，用乙腈-水(95:5)5ml洗滌雞心瓶，并過(guò)SPE柱，吹去柱內(nèi)滯留的液體。用5ml乙腈-水(7

3、5:25)洗脫待測(cè)物至10ml容量瓶中，用水(用磷酸調(diào)pH值至4.0)定容至10ml，用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，收集濾液供高效液相色譜測(cè)定。 高效液相色譜檢測(cè)條件為：ODS-A柱，流動(dòng)相為水(用磷酸調(diào)pH至4.0)-乙腈(80:20)，等梯度洗脫，流速為1.00ml/min，柱溫為25℃，進(jìn)樣量50μl，紫外檢檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。 在上述條件下，SD和SMM在0.05-1.00μg/ml間有良好的線性關(guān)系，相

4、關(guān)系數(shù)分別為0.99997，0.99997。本研究所建立的方法對(duì)SD的最低檢出限為10μg/L，對(duì)SMM的最低檢出限為10μg/L。SD在添加濃度為0.05-1.00μg/ml時(shí)的回收率為70.3％-102.5％，RSD為5.6％-8.2％；SMM在添加濃度為0.05-1.00μg/ml時(shí)的回收率為80.8％-113.6％，RSD為4.6％-8.8％。完全達(dá)到實(shí)用要求。 用這種方法研究?jī)煞N磺胺類藥物在牛奶中的消除規(guī)律，確立了合理