紅法夫酵母生產(chǎn)蝦青素的研究.pdf

1、本文以紅法夫酵母為研究對象，從誘變、培養(yǎng)、優(yōu)化和添加物影響幾個方面對紅法夫酵母生產(chǎn)蝦青素進行了系統(tǒng)的研究。
　　 常溫常壓等離子體誘變(ARTP)是一種新型誘變方法，具有操作容易、上手簡單、自身安全和對環(huán)境無污染等優(yōu)點。目前利用其誘變紅法夫酵母的文章還沒有，故我們將野生型酵母菌株AS2.1557作為原始菌株，利用ARTP進行誘變。確定3×10-4β-紫羅酮作為篩選劑，經(jīng)篩選得到突變菌株A7，并經(jīng)傳代培養(yǎng)檢測遺傳穩(wěn)定性較好。用YM

2、培養(yǎng)基作為發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)，誘變菌株蝦青素的產(chǎn)量約為1.67mg/L，較原始菌株提高了40％，蝦青素含量為224.6μg/g，較出發(fā)菌株提高了42％。
　　 通過單因素試驗考察了不同碳源、氮源等培養(yǎng)基對紅法夫酵母生長和蝦青素積累的影響，挑選出三個重要因素，利用響應面法(RSM)和BBD優(yōu)化確定了誘變菌株的最佳培養(yǎng)基:蔗糖36.64、硫酸銨3.1、酵母提取物1.79、CaCl20.1、KH2PO42、MgSO40.5、NaCl20.

3、1(單位g/L)。然后對發(fā)酵條件進行了單因素試驗，簡單確定了合適的培養(yǎng)條件，10％接種量，50mL裝液量，培養(yǎng)溫度20℃，搖床轉速200rpm，pH=5.5。搖瓶培養(yǎng)細胞干重和蝦青素產(chǎn)量為7.8g/L和3.6mg/L。另外本文還研究了誘變菌株在發(fā)酵罐中的生長情況并繪制了紅法夫酵母的各種動力學曲線，為以后的動力學研究和發(fā)酵罐的擴大培養(yǎng)奠定基礎。
　　 本文研究了添加物對原始菌株和A7的影響及作用機制。首先我們研究了添加物對原始菌株

4、影響，48h添加煙酰胺在20mg/L時蝦青素產(chǎn)量達到最大值1.8mg/L比空白增加了15％，煙酸濃度為9mg/L時其蝦青素產(chǎn)量達到最大值量比空白增加了6％。氧載體雙氧水濃度20μL/L時達到最大值2.47mg/L比空白增加了大約20％。豆油濃度為10ml/L達到最大值為2.38mg/L比空白增加了大約37.6％，效果顯著。亞甲基藍濃度為0.5g/L的時候，蝦青素的產(chǎn)量達到最大值1.962mg/L比空白增加了20％。不飽和脂肪酸影響微小，