生物檢測(cè)用超小尺寸磁性納米探針研究.pdf

1、基于磁性納米粒子的磁性納米探針已經(jīng)越來(lái)越多地被應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域。尺寸是衡量磁性納米探針的一個(gè)重要指標(biāo)，制備出穩(wěn)定的超小磁性納米粒子以及構(gòu)建功能化的超小磁性納米探針，對(duì)于腫瘤的早期診斷、治療效果及預(yù)后評(píng)價(jià)將有極其重大的意義。本文采用二巰基丁二酸作為修飾材料，用它取代油酸包裹的四氧化三鐵磁性納米粒子表面的油酸分子，制備出水溶性好、穩(wěn)定性能高、適合生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用的超小磁性納米粒子。并利用它們構(gòu)建出體內(nèi)外靶向食道癌細(xì)胞的超小磁性納米探針。論

2、文的主要工作包括以下幾個(gè)方面：
　　 1．通過(guò)氧化共沉淀法，制備出油酸包裹的四氧化三鐵磁性納米粒子(OA-USPIO);用二巰基丁二酸對(duì)其表面進(jìn)行修飾得到樣品(DMSA-USPIO);并用TME、FTIR、TGA、VSM等表征其形貌結(jié)構(gòu)、尺寸、表面功能基團(tuán)及磁性。電鏡結(jié)果表明，兩種粒子都呈近球形，尺寸分別只有4.65和5.56nm;紅外分析兩者都具有特征吸收峰；TGA分析，得修飾在超小磁性納米粒子上的OA和DMSA分別占總質(zhì)量的

3、31.8％和24.2%;VSM表明兩種粒子都具有超順磁性，飽和磁化強(qiáng)度分別為34.47和34.21emu/g;ELISA實(shí)驗(yàn)得DMSA-USPIO(2.79×10-7M)關(guān)于TMB的Km值為0.255mM，關(guān)于H2O2的Km值為237mM，揭示了其具有模擬酶催化活性；DMSA-USPIO的弛豫率測(cè)定結(jié)果為r1=0.76，r2=17.2mM-1s-1，弛豫率比值r2/r1等于22.6，揭示了其可以作為一種優(yōu)良的T2造影劑。
　　

4、2．利用尼妥珠單抗，在偶聯(lián)劑（EDC/NHS）的作用下，構(gòu)建了一種新型的體內(nèi)外靶向食道癌細(xì)胞的超小磁性納米探針(NTZ-DMSA-USPIO probe)。用凝膠色譜法純化超小磁性納米探針，除去了游離的抗體；紫外分析表明不同抗體制備納米探針有所不同，而100μlEDC的用量對(duì)于探針的制備相對(duì)來(lái)說(shuō)更理想；ELISA實(shí)驗(yàn)比較了超小磁性納米粒子和超小磁性納米探針的模擬酶催化性能，揭示了超小磁性納米探針可以被用于生物檢測(cè)：最后用DLS進(jìn)行了水動(dòng)

5、力尺寸表征，游離的BSA，超小磁性納米粒子，BSA封閉的超小磁性納米探針的尺寸分別是5.6nm，24.4nm和35.8nm。
　　 3．將該超小磁性納米探針用于免疫組化檢測(cè)和MRI磁共振成像實(shí)驗(yàn)，分別于體外體內(nèi)對(duì)它們的檢測(cè)效果進(jìn)行了評(píng)價(jià)。從免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看到，偶聯(lián)了尼妥珠單抗的超小磁性納米探針（實(shí)驗(yàn)組），在抗原抗體作用下，與食道癌細(xì)胞膜上的EGFR受體結(jié)合．通過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)DAB染色之后，在細(xì)胞膜上出現(xiàn)了褐色的沉淀，而辣根