阿維拉霉素生產菌誘變育種及發(fā)酵工藝優(yōu)化.pdf

1、阿維拉霉素(卑霉素)是由產綠鏈霉菌發(fā)酵得到的寡糖類抗生素，是一種新型的生長促進劑。
　　 本論文采用紫外線和NTG誘變結合抗性篩選高產菌株，選育出可以用于阿維拉霉素生產的高產菌株SDSL-284，效價843μg/ml，比出發(fā)菌株提高了106.6％。該菌株斜面培養(yǎng)中發(fā)現，斜面孢子的豐富程度與所用的培養(yǎng)基關系密切，瓊脂的質量對孢子含量有直接關系，海燕瓊脂有利于孢子的累積；得到的新鮮斜面冰箱保存，2周內效價沒有影響，對阿維拉霉素產生菌

2、菌種的保存方式進行了探討，在新鮮斜面、凍存種子液和凍存孢子三種保存方式分別保存一段時間進行效價驗證，發(fā)現凍存孢子是保存菌種的最佳方式。研究中凍存孢子的接種量對種子瓶的種子質量影響較大，最終確定凍存孢子的接種量為0.5％，即約0.2×107個孢子。
　　 利用搖瓶發(fā)酵研究了發(fā)酵培養(yǎng)基中碳源的含量，確定了發(fā)酵培養(yǎng)基中碳源最佳組合可溶性淀粉40.0g/l和葡萄糖20.0g/l，在此組合下補糖可以提高阿維拉霉素產量。利用種子罐摸索了種子

3、的培養(yǎng)工藝中各參數對生產上發(fā)酵的影響，得到以下結論：種子罐中種子的培養(yǎng)溫度為28℃，培養(yǎng)基的最適pH范圍應控制在6.4～6.6；培養(yǎng)過程中溶氧水平控制在30％～50％，低于此水平對菌絲的生長不利；種子罐的種齡為30h左右，轉發(fā)酵罐的轉種量為5％。種子罐參數確定后，進行發(fā)酵罐工藝參數及過程控制的優(yōu)化，優(yōu)化的結果是：發(fā)酵罐滅菌后初始pH為7.0～7.2，發(fā)酵過程30％堿水控pH在6.7左右，補加葡萄糖維持過程還原糖濃度為5～20g/l，補加