版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、恩拉霉素(enramycin)是放線菌(Streptomyces fungicidious)分泌的,由不飽和脂肪酸與十幾種氨基酸結(jié)合的多肽類抗生素。主要成分為恩拉霉素A和恩拉霉素B,還含有少量的恩拉霉素C和D。恩拉霉素對革蘭氏陽性菌有良好的抗菌作用,通過抑制其細(xì)胞壁前聚物質(zhì)的合成來影響生物體,特別是對腸內(nèi)的有害梭狀芽孢桿菌(Clostridium)抑制力很強(qiáng)。因其能起到良好的促生長作用,目前作為飼料添加劑使用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)。本文對Stre
2、ptomyces fungicidious KS010菌株發(fā)酵產(chǎn)恩拉霉素進(jìn)行了初步研究,主要包括恩拉霉素測定方法的建立、高產(chǎn)恩拉霉素菌株的選育、恩拉霉素發(fā)酵條件的優(yōu)化及上罐培養(yǎng)等內(nèi)容。
首先優(yōu)化了恩拉霉素的微生物檢定法和高效液相色譜法的檢定條件,建立了測定恩拉霉素的微生物檢定法和高效液相色譜法(HPLC)標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過浸提溶液組成、浸提時間、檢定菌濃度考察,優(yōu)化了微生物檢定法的檢定條件。在檢定條件為丙酮浸提液B(丙酮:2m
3、ol/L鹽酸:水=20:1:21)、浸提時間80min、檢定菌濃度106個/mL的情況下,建立恩拉霉素微生物檢定法標(biāo)準(zhǔn)曲線。恩拉霉素濃度在0.56-35.79U/mL之間,其濃度的對數(shù)值與相應(yīng)的抑菌圈直徑呈直線相關(guān);回歸方程為Y=0.2436X-3.47436,相關(guān)系數(shù)r為0.9960。通過流動相配比、流速和浸提時間的考察,優(yōu)化了HPLC的檢定條件。在色譜條件為檢測波長267nm,流動相為乙腈:50mM KH2PO4(30:70),流速
4、為0.8 mL/min的情況下,建立恩拉霉素HPLC標(biāo)準(zhǔn)曲線。恩拉霉素濃度在0.26-275.72U/mL范圍內(nèi),得到的回歸方程Y=1.83099E-6X-0.5284.6,相關(guān)系數(shù)r為0.99947。采用同種樣品,對兩種測定方法進(jìn)行比較,所得結(jié)果重復(fù)性好,準(zhǔn)確性高,都可用于含恩拉霉素的樣品測定。
對出發(fā)菌株(Streptomyces fungicidious KS010)進(jìn)行NTG誘變、通過瓊脂塊法進(jìn)行初篩,獲得M-19
5、菌株,產(chǎn)量較出發(fā)菌株提高32.62%。接著以該菌株為研究對象,比較了紫外復(fù)合誘變和60Co-γ復(fù)合誘變的效果,結(jié)果表明60Co-γ復(fù)合誘變優(yōu)于紫外復(fù)合誘變。從60Co-γ復(fù)合誘變正變株中獲得一株搖瓶效價達(dá)1853U/mL,較出發(fā)菌株提高68.00%的菌株。通過繼代培養(yǎng),該菌株穩(wěn)定性好,命名為Streptomyces fungicidious Co250-42。
通過單因素試驗(yàn)和中心組合響應(yīng)面優(yōu)化分析考察了影響Strepto
6、mycesfungicidious KS010菌株產(chǎn)恩拉霉素的因素,得到液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)恩拉霉素的最佳條件。結(jié)果表明,當(dāng)酵母浸出粉1.29%、磷酸二氫鉀濃度10.84mmol/L、氯化鋅濃度8.74mmol/L和葡萄糖5.93%時,初始pH8.0,33℃,發(fā)酵7天,其恩拉霉素效價為2065.82U/mL,較出發(fā)菌株效價(1041U/mL)提高了98.30%。
以誘變菌株Streptomyices fungicidious Co2
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 阿維拉霉素生產(chǎn)菌推理選育及其發(fā)酵條件的初步研究.pdf
- 慶大霉素高產(chǎn)菌的選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化研究.pdf
- 井岡霉素產(chǎn)生菌的誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- N+注入誘變選育井岡霉素A高產(chǎn)菌及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- 抗霉素產(chǎn)生菌的選育、發(fā)酵條件優(yōu)化及組分的研究.pdf
- 古龍酸發(fā)酵伴生菌的選育及其條件優(yōu)化.pdf
- L-精氨酸產(chǎn)生菌的選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- L-組氨酸產(chǎn)生菌的選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- 阿維拉霉素生產(chǎn)菌誘變育種及發(fā)酵工藝優(yōu)化.pdf
- 鏈霉素生產(chǎn)菌株的選育及發(fā)酵條件的研究.pdf
- 菊粉內(nèi)切酶產(chǎn)生菌的選育鑒定及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- Vc二步發(fā)酵新菌系的太空誘變選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- L-組氨酸產(chǎn)生菌的選育及其發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf
- L-色氨酸高產(chǎn)菌的選育及其發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf
- PHA生產(chǎn)菌株的選育及其混合發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf
- 達(dá)托霉素的菌種選育及發(fā)酵條件的優(yōu)化研究.pdf
- 達(dá)托霉素高產(chǎn)菌株選育及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf
- 金霉素生產(chǎn)菌種的選育及發(fā)酵工藝優(yōu)化研究.pdf
- γ-癸內(nèi)酯產(chǎn)生菌選育、發(fā)酵條件優(yōu)化及其細(xì)胞固定化的研究.pdf
- 肌苷產(chǎn)生菌的選育及其發(fā)酵條件研究.pdf
評論
0/150
提交評論