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文檔簡(jiǎn)介
1、井岡霉素是氨基糖苷類農(nóng)用抗生素,由吸水鏈霉菌井岡變種(Streptomyceshygroscopicus var.jinggangsisyen)發(fā)酵產(chǎn)生。井岡霉素能有效地防治水稻紋枯病,成本低,高效、安全,使用30余年未發(fā)現(xiàn)抗性,是當(dāng)今產(chǎn)量和使用面積最大的農(nóng)用抗生素,它的開(kāi)發(fā)利用具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。受武漢科諾生物科技股份有限公司委托,本論文對(duì)井岡霉素產(chǎn)生菌的誘變和選育等方面進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,主要完成了一下幾個(gè)方面的工作,并得到
2、了相關(guān)結(jié)論。 以KN-16為出發(fā)菌株進(jìn)行紫外線誘變、60Coγ射線誘變、亞硝酸-紫外復(fù)合誘變這一系列的逐級(jí)誘變,發(fā)現(xiàn)井岡霉素產(chǎn)生菌對(duì)紫外,60Coγ射線敏感,對(duì)亞硝酸敏感度較弱,且每級(jí)誘變均能不同程度地提高井岡霉素產(chǎn)生菌的產(chǎn)能,并確定了最適的誘變劑量。通過(guò)對(duì)KN-16的逐級(jí)誘變選育,分別得到了誘變株U-17、Co-40和F-87,其產(chǎn)量較出發(fā)菌株分別提高了21.0%、22.2%和27.4%。 真正的高產(chǎn)菌株必須具備很強(qiáng)的
3、對(duì)自身產(chǎn)物的耐受性,一個(gè)菌株的生產(chǎn)能力與耐自身抗生素的濃度是成正比的,因此,抗自身產(chǎn)物能力是高產(chǎn)菌株的特性之一。本文研究了平板培養(yǎng)基中井岡霉素A的濃度對(duì)生產(chǎn)菌株的影響,發(fā)現(xiàn)平板中井岡霉素A的濃度達(dá)到3%時(shí)會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)。通過(guò)紫外誘變的手段,結(jié)合在平板上進(jìn)行耐自身產(chǎn)物抗性突變株的理性化篩選,得到比KN-16產(chǎn)量提高了的多株誘變菌,其中高產(chǎn)菌株k-101,搖瓶發(fā)酵井岡霉素A的產(chǎn)量達(dá)到了2.39%,比出發(fā)菌株KN-16產(chǎn)量提高了33.5%,
4、且該菌株遺傳性能穩(wěn)定。通過(guò)進(jìn)一步篩選,得到另一株高產(chǎn)菌株k-121,搖瓶發(fā)酵產(chǎn)素能力比k-101要高出30%。 通過(guò)KN-16的15L發(fā)酵罐發(fā)酵,了解了井岡霉素產(chǎn)生菌發(fā)酵過(guò)程中總糖、葡萄糖、氨基氮、溶氧、pH和井岡霉素A產(chǎn)物合成等參數(shù)的變化規(guī)律及發(fā)酵過(guò)程中培養(yǎng)基粘度的變化和泡沫的變化等規(guī)律,為誘變所得高產(chǎn)菌株k-121的發(fā)酵做了前期準(zhǔn)備。在15L發(fā)酵罐KN-16發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素A的產(chǎn)量可達(dá)到1.91%,比搖瓶的1.76%要高出8
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