新型DNA電化學發(fā)光生物傳感器的研究.pdf

1、本論文研究了Ru(bpy)32+-SiO2納米顆粒發(fā)光性能，并以Ru(bpy)32+-Si02納米顆粒為標記物制備了高靈敏度的DNA-ECL探針，分別結合DNA鄰近表面雜交技術和分子信標技術構建了兩種靈敏的電化學發(fā)光DNA傳感器。
　　 本論文的研究內容主要包括以下兩個方面：
　　 在第一章我們基于鄰近表面雜交和Ru(bpy)32+-Si02納米顆粒作為ECL標記物，構建了一種靈敏的檢測DNA的電化學發(fā)光傳感器。構建過程

2、包含兩步：首先，3′端巰基修飾的捕捉DNA探針通過金-硫鍵自組裝到金電極上，然后金電極浸到含有目標DNA和Ru(bpy)32+-Si02標記的檢測DNA的小瓶中發(fā)生鄰近表面雜交反應。鄰近表面雜交是基于捕捉探針和Ru(bpy)32+-Si02標記的檢測探針對目標DNA的同時識別。即當目標DNA存在時，目標DNA序列片段的一半與捕捉DNA序列片段一半互補雜交，而另一半片段與檢測探針的一半片段互補雜交，形成雜交復合物。該鄰近表面雜交最終使得發(fā)

3、光標記物-Ru(bpy)32+-Si02納米顆粒非常接近于電極表面，從而使得電化學反應的電子轉移效率大大提高，發(fā)光靈敏度顯著提高。此外，以Ru(bpy)32+-Si02納米顆粒作為ECL標記物，也極大地增敏了測定靈敏度，它的電化學發(fā)光強度約是單一Ru(bpy)32+發(fā)光強度的100倍。在優(yōu)化的條件下，DNA的電化學發(fā)光傳感器對目標DNA檢測的線性范圍是2.0×10-15～2.0×10-11mol/L，檢測下限可達1.0×10-15mol

4、/L。
　　 在第二章我們利用發(fā)卡結構的捕捉探針構型轉換和納米顆粒對電化學發(fā)光信號的放大作用構建了一種新的電化學發(fā)光DNA傳感器。首先巰基修飾的具有發(fā)卡結構的捕捉DNA探針自組裝到金電極上并用Ru(bpy)32+-Si02納米顆粒標記。在沒有目標DNA存在時，捕捉DNA探針以莖環(huán)結構存在，標記在其上的Ru(bpy)32+-Si02納米顆粒是非?？拷姌O表面的，此時它產生一個很強的電化學發(fā)光信號；而當加入目標DNA后，目標DNA與