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1、本文研究了應(yīng)用魯米諾的電化學(xué)發(fā)光(ECL)作為酶催化反應(yīng)的信號(hào)輸出研制ECL-生物傳感器。由于酶催化反應(yīng)的產(chǎn)物為H2O2,因此,可以通過H2O2對(duì)魯米諾電化學(xué)發(fā)光的增敏作用來制作不同的酶生物傳感器,并將它們用于實(shí)際樣品的檢測(cè)。由于電化學(xué)發(fā)光的高靈敏度以及酶的高選擇性,因此制備的酶生物傳感器能夠很靈敏的檢測(cè)目標(biāo)物的含量,檢測(cè)的靈敏度高,檢測(cè)限低。 第一部分研究了鐵氰化鉀對(duì)魯米諾電化學(xué)發(fā)光的增敏作用,發(fā)現(xiàn)鐵氰化鉀可以促進(jìn)魯米諾的氧化
2、,從而增敏魯米諾的電化學(xué)發(fā)光,并將該體系用于海帶中尿酸的含量的測(cè)定,檢測(cè)結(jié)果重現(xiàn)性好。 第二部分研究了ECL-尿酸生物傳感器的制備,并討論了鐵氰化鉀對(duì)該酶催化反應(yīng)的作用。將尿酸酶用電聚合的方法修飾在鉑電極表面,制得的修飾電極能對(duì)魯米諾的ECL產(chǎn)生增敏作用,且檢測(cè)尿酸的線性范圍是7.5×10-11mol/L~8.3×10-6mol/L,并將它用于紫菜中尿酸含量的檢測(cè),得到的結(jié)果滿意,重現(xiàn)性高,穩(wěn)定性好,且酶膜不容易脫落。
3、第三部分研究了ECL-谷丙轉(zhuǎn)氨酶生物傳感器的制備,由于谷丙轉(zhuǎn)氨酶催化丙氨酸和α-酮戊二酸轉(zhuǎn)化生成丙酮酸和谷氨酸,丙酮酸氧化酶能夠與丙酮酸反應(yīng)產(chǎn)生過氧化氫,能夠增敏魯米諾的電化學(xué)發(fā)光,從而間接檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量。用該方法檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶的線性范圍為0.00475~350 U/L,并將它用于血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的檢測(cè)。 第四部分研究了ECL-膽堿生物傳感器的制備,同樣由于膽堿氧化酶可以與膽堿反應(yīng)生成過氧化氫,利用該過程來檢測(cè)膽堿的含量。
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