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文檔簡介
1、本實驗研究的藍藻是從雨生紅球藻中分離出來的一株內(nèi)生藍藻。前期測序和電鏡圖表明此株藍藻是一個新種,在不同光照條件下的細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)差別很大,強光藻體有明顯葉綠體結(jié)構(gòu),所以本文對藍藻兩種光照下的光系統(tǒng)色素組成進行了研究,通過測定其色素組成和含量從而為葉綠體起源提供依據(jù)。
本文主要研究結(jié)果如下:
葉綠素的分離純化實驗表明:葉綠素提取時,選取100%丙酮提取,效果最好,能最大限度地將葉綠素從藻體中提取出來;選取紙層析方法分離葉
2、綠素,選取的展開劑系統(tǒng)為:石油醚:丙酮7:3(體積比)。進行的光譜學(xué)特征測定進一步確定了強光下藻種葉綠素種類為:葉綠素a和葉綠素b,弱光下藻種葉綠素只有葉綠素a一種,并進行了含量計算。
類胡蘿卜素的分離純化實驗表明:類胡蘿卜素提取時,選取100%丙酮提取,效果較好,萃取濃縮時較為容易將石油醚與丙酮分開;選取紙層析的方法分離類胡蘿卜素簡便快捷,選取的展開劑系統(tǒng)為,β-胡蘿卜素:石油醚:丙酮7:3,葉黃素的分離選取的展開劑為:石油
3、醚:丙酮:異辛烷20:2:1;同時加入幾滴醋酸來調(diào)節(jié)溶劑的極性達到最好的分離效果。光譜學(xué)特征測定進一步確定了類胡蘿卜素的種類和含量。強光下含有β-胡蘿卜素和葉黃素,弱光下只有β-胡蘿卜素。
藻藍蛋白分離純化實驗表明:提取藻藍蛋白選取的最佳提取劑為0.75MPBS緩沖液,并且放冰箱過夜提取。純化藻藍蛋白的過程采用二次鹽析的方法,選取的硫酸銨濃度為:一次鹽析為25%,二次鹽析為55%,沉淀用0.01molPBS溶解效果最好。通過對
4、純化后藻藍蛋白的提取液的紫外吸收光譜和熒光發(fā)射光譜的測定,進一步為藻藍蛋白的種類和類型含量計算提供了依據(jù),并得出結(jié)論:弱光下藻藍蛋白濃度較高,并且只含有C型藻藍蛋白一種,強光下藻種中未發(fā)現(xiàn)藻藍蛋白。
本實驗通過對色素組成分析得出,弱光下光能傳遞機理為:光能-大部分葉綠素a、β-胡蘿卜素-葉綠素a。強光下光能傳遞機理為:光能-葉綠素b、類胡蘿卜素、大部分葉綠素a-葉綠素a。弱光藍藻色素組成為典型原核生物特征,而在光照強度變化后,
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