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1、瓊脂糖凝膠介質(zhì)是多糖類層析分離介質(zhì)中應(yīng)用最廣的一種。作為一種天然的多糖材料,瓊脂糖微球由于具有多孔性、親水性、不含帶電基團(tuán)以及多糖鏈上的羥基在一定的條件下可以偶聯(lián)上不同的配基等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)、復(fù)合大分子、核酸、多糖、質(zhì)粒以及病毒的分離純化。 目前層析分離中主要應(yīng)用的瓊脂糖微球,如Sepharose4FF、Sepharose6FF以及以此為基礎(chǔ)偶聯(lián)不同配基所制備的一系列疏水、親和、離子交換介質(zhì)等,其平均粒徑均在90微米左右
2、,粒徑分布范圍一般在45-165微米之間。 由于傳統(tǒng)方法制備得到的大粒徑瓊脂糖微球存在粒徑分布較寬,制得微球需要通過(guò)復(fù)雜的后期篩分過(guò)程來(lái)進(jìn)行分離,產(chǎn)品的收率低以及制備重復(fù)性差等問(wèn)題,本論文提出通過(guò)微孔膜乳化法制備大粒徑瓊脂糖微球,并對(duì)膜乳化法制備瓊脂糖微球過(guò)程中影響粒徑和粒徑分布的因素進(jìn)行了討論。 本文以6%的瓊脂糖溶液為水相,不同體積配比的液體石蠟(LP)和石油醚(PE)的混合溶液為油相,采用微孔膜乳化法制備了平均粒徑
3、為90微米的瓊脂糖微球??疾炝宋⒖啄つた状笮 ⒂拖嘟M成、乳化劑種類、乳化劑濃度、反應(yīng)溫度、壓力、水相原料、水相加熱時(shí)間、磁子轉(zhuǎn)數(shù)、固化過(guò)程中的機(jī)械攪拌速度等因素對(duì)成球粒徑及粒徑分布的影響,并從油水相間界面張力、油水相粘度等方面對(duì)形成的瓊脂糖微球粒徑及均一性進(jìn)行了解釋。 結(jié)果表明,當(dāng)使用膜孔大小為25.9微米的微孔膜;油相組成為體積比11:1的液體石蠟與石油醚的混合溶液;乳化劑為1%的PO-5S;操作溫度為65℃;Promega公
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