利用組織培養(yǎng)技術(shù)提高杜仲膠產(chǎn)量.pdf

1、杜仲(EucommiaulmoidesOliv.)既是名貴的中藥材，又是重要的膠源植物。杜仲膠以其特有的高絕緣性、高強(qiáng)度、耐酸堿、防老化和形狀記憶性等特點，被廣泛應(yīng)用于許多領(lǐng)域。但是由于杜仲樹生長緩慢，且主要提膠原料杜仲葉的含膠量低，使杜仲膠的工業(yè)化生產(chǎn)受得了限制。如果采用植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，在組織和細(xì)胞水平上促進(jìn)杜仲膠的合成，就可以在不受田間條件制約的情況下進(jìn)行杜仲膠的快速大量生產(chǎn)。為此，本文提出了利用組織培養(yǎng)技術(shù)提高杜仲膠產(chǎn)量的

2、研究課題。 本文首先利用杜仲種子進(jìn)行杜仲無菌苗培養(yǎng)，試驗發(fā)現(xiàn)，杜仲種子的最適發(fā)芽溫度為20℃，另外，采用去掉部分胚乳發(fā)芽法可以使發(fā)芽率提高到94％。 以無菌苗的幼莖、葉片及子葉等為外植體，誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，并對植物生長調(diào)節(jié)劑、培養(yǎng)基、光照時間、培養(yǎng)溫度等對愈傷組織生長的影響進(jìn)行研究，同時建立愈傷組織體系。結(jié)果表明：采用MS培養(yǎng)基并且附加2.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA有利于愈傷組織的誘導(dǎo)。B5培養(yǎng)基上附加1.

3、0mg/LNAA+1.5mg/L6-BA，同時控制培養(yǎng)基pH值6.5、光照時間12h/d、培養(yǎng)溫度25±2℃，有利于愈傷組織的生長。 在杜仲的組織培養(yǎng)中，愈傷組織中杜仲膠的含量與愈傷組織的生長周期、繼代培養(yǎng)次數(shù)、培養(yǎng)基中前體乙酸的濃度等都有密切關(guān)系。愈傷組織接種到培養(yǎng)基上以后，其杜仲膠含量首先略有下降而后又迅速上升，接種第20天后，愈傷組織中杜仲膠的積累基本趨于穩(wěn)定。另外，愈傷組織的含膠量隨著繼代次數(shù)的增加呈逐漸增多的趨勢，第5

4、代～第8代處于一個含膠量的高峰值，之后又迅速下降。乙酸的添加能提高愈傷組織中杜仲膠的含量，且隨著培養(yǎng)基中乙酸濃度的升高，含膠量呈升高的趨勢，但同時又會影響愈傷組織的生長。培養(yǎng)基的最適乙酸濃度為1.0mmol/L，此時愈傷組織中的杜仲膠含量為7.59％，愈傷組織的增長率為2255.26％。 通過對杜仲不同組織中含膠細(xì)胞的顯微觀察發(fā)現(xiàn)，杜仲含膠細(xì)胞是一種細(xì)長的、兩端略膨大的、絲狀分泌單細(xì)胞，其橫切面形狀多樣。在當(dāng)年生的生的杜仲幼莖中