油茶組織培養(yǎng)技術(shù)研究.pdf

1、油茶(Camellia oleifera)是我國南方重要的木本食用油料樹種。本研究以油茶優(yōu)良品種為試材，以其幼胚和未成熟子葉、嫩稍帶芽莖段、嫩葉為外植體，通過組織培養(yǎng)技術(shù)，采用正交實(shí)驗(yàn)、方差分析和多重比較等方法，篩選出了油茶幼胚無菌苗最適培養(yǎng)配方以及未成熟子葉、帶芽莖段、葉片的誘導(dǎo)與增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)與移栽等各個階段最佳培養(yǎng)基配方，建立了油茶幼胚和子葉、帶芽莖段以及葉片的再生體系；此外，探索了油茶花藥離體培養(yǎng)影響因子。主要結(jié)果如下：

2、r>　　 1．油茶幼胚和未成熟子葉組織培養(yǎng)技術(shù)研究。油茶幼胚無菌苗的最適培養(yǎng)配方為WPM+6—BA2．0mg/L+NAA1．5mg/L，成苗率為90％；未成熟子葉胚性愈傷組織誘導(dǎo)配方為： WPM+6—BA1．0mg/L+NAA0．5mg/L，胚狀體形成以及根芽分化的最適培養(yǎng)配方為： MS+6—BA3．0mg/L+NAA1．0mg．L—1。
　　 2．油茶帶芽莖段組織培養(yǎng)技術(shù)研究。帶芽莖段腋芽誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基配方為：1/2MS+

3、6—BA1．0mg/L+NAA0．5mg/L；增殖培養(yǎng)的最適培養(yǎng)基配方為：1/2MS+6—BA1．0mg/L+NAA0．05mg/L，增殖倍數(shù)可達(dá)5倍以上；壯苗的最適培養(yǎng)基配方為：蔗糖2g/L+NAA0．1 mg/L；采用1000ppm的IBA處理芽苗基部5S，轉(zhuǎn)入1/2MS空白培養(yǎng)基培養(yǎng)，30d后芽苗的生根率為88．3％，平均生根條數(shù)為7．9％，整個再生體系的完成最短周期的一批苗僅需70d，經(jīng)過煉苗后的油茶苗在泥炭：蛭石(1：1)的基

4、質(zhì)中生長，成活率最高，可達(dá)88．57％。
　　 3．油茶葉片組織培養(yǎng)技術(shù)研究。愈傷組織誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基配方為WPM+TDZ1．5mg/L+NAA0．5mg/L+6—BA2．0mg/L；愈傷組織分化叢生芽的最適培養(yǎng)基配方為：1/2MS+TDZ1．0mg/L+NAA0．1 mg/L+6—BA2．0mg/L，可使誘導(dǎo)分化率達(dá)17．86％；分化芽增殖的最適培養(yǎng)基配方為：1/2MS+6—BA1．0 mg/L+IBA0．05 mg/L，增殖

5、系數(shù)達(dá)2．79；生根培養(yǎng)的配方為：1/2MS+TDZ0．05mg/L+IBA1．0mg/L。
　　 4．油茶花藥離體培養(yǎng)影響因子研究?；ㄋ幾钸m的低溫保持方式為以帶花蕾枝條的底部插入水中；花藥的低溫預(yù)處理時間應(yīng)在10d以內(nèi)；花藥愈傷組織誘導(dǎo)的最適時期為花粉四分體時期；活性C、AgNO3以及Vc三種降低花藥褐化的培養(yǎng)基添加物中，以AgNO3效果最優(yōu)，其誘導(dǎo)率最高，為81％；最適增殖培養(yǎng)基配方為：MS+2．0 mg/L6—BA+0．0