超靈敏免疫傳感器的制備并用于生物標志物的檢測.pdf

1、生物傳感器屬于新興生物電子學(xué)科的研究領(lǐng)域，它是利用生物活性分子（如抗原、抗體、蛋白質(zhì)、酶、DNA、細胞等）的識別功能，將生化信號轉(zhuǎn)變?yōu)檩敵龅目捎眯盘?，從而實現(xiàn)生命物質(zhì)與化學(xué)物質(zhì)的檢測與監(jiān)控的裝置。而免疫傳感器是將化學(xué)分析方法與免疫技術(shù)結(jié)合于一體發(fā)展而來的一種具有操作簡便、選擇性高、檢測迅速、靈敏度高等優(yōu)勢的生物傳感器。作為傳感器一個重要分支的免疫傳感器涉及了化學(xué)、材料、生物、醫(yī)學(xué)、物理、信息技術(shù)、微電子技術(shù)等學(xué)科領(lǐng)域，無論是在機理方面的

2、研究，還是實際應(yīng)用方面的研究，免疫傳感器都激發(fā)了各國工作者極大的研究熱情。其應(yīng)用領(lǐng)域主要包括醫(yī)療診斷、環(huán)境監(jiān)測、食品工業(yè)、國防應(yīng)用等。本論文主要做了如下工作:
　　（一）二茂鐵-苯丙氨酸(Fc-F)水凝膠在電化學(xué)免疫傳感器中的應(yīng)用研究
　　合成的二茂鐵-苯丙氨酸(Fc-F)超分子水凝膠材料具有氧化還原活性，且Fc-F在H2O2的作用下二茂鐵基端可被氧化，導(dǎo)致凝膠結(jié)構(gòu)被破壞從而降低了凝膠的氧化還原活性。我們預(yù)先修飾好水凝膠/殼

3、聚糖電極，合成了碳納米管/葡萄糖氧化酶/二抗復(fù)合物，運用“三明治”夾心法，制備了免疫傳感器，實現(xiàn)了對人免疫球蛋白IgG的檢測。此免疫傳感器靈敏度高、選擇性好、重現(xiàn)性優(yōu)良，在0.1～100 pg/ml范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。同時在血清樣品中，對抗原IgG的回收率進行了研究，進一步證實此方法可用于實際樣品的檢測。
　　（二）基于硅烷化探針生物傳感試紙的應(yīng)用研究
　　在對免疫傳感試紙的研究中，合成了3-氨丙基三甲氧基硅烷(APT

4、MS)/戊二醛(GA)復(fù)合物，將其作為顏色探針，同時實現(xiàn)了對過氧化氫、葡萄糖、腫瘤標志物前列腺特異性抗原(PSA)的檢測。在實驗過程中我們發(fā)現(xiàn)復(fù)合物APTMS-GA呈現(xiàn)磚紅色，并且當其與H2O2作用時，可以看到明顯的顏色變化（磚紅色-淡黃色-白色），因此在濾紙上修飾此復(fù)合物再與H2O2作用后，通過軟件Image J對顏色強度分析，進而實現(xiàn)對H2O2的定量檢測。通過在濾紙上固定葡萄糖氧化酶(GOx)，檢測葡萄糖在GOx的作用產(chǎn)生的H2O2