基于新型半花菁染料的DNA熒光探針.pdf

1、本論文合成了一系列以喹嗪為母體的新型半花菁染料，并系統(tǒng)地研究了它們與小牛胸腺DNA的相互作用。本論文主要分為以下幾個(gè)部分:
　　首先合成了半花菁染料L，通過核磁共振光譜、質(zhì)譜、元素分析等分析手段對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了確認(rèn)。在磷酸緩沖液(pH=7.4)中，通過紫外-可見吸收光譜、熒光光譜滴定，研究了小分子化合物L(fēng)與小牛胸腺DNA的相互作用，測(cè)定其與DNA的結(jié)合常數(shù)為4.27×107 M-2(R=0.9996)，檢測(cè)限為8.04×10-8

2、 M;此外，通過DNA的熱變性實(shí)驗(yàn)及L與EB的競(jìng)爭實(shí)驗(yàn)定性地分析了L與小牛胸腺DNA的相互作用模式主要為嵌插作用;通過DNA酶催化DNA水解實(shí)驗(yàn)，證明L可以用于監(jiān)測(cè)DNA酶的活性及水解過程;通過生物細(xì)胞成像，證明L可以用于活細(xì)胞內(nèi)DNA成像;最后，加入DNA后，可以引起溶液顏色明顯變化，所以可以通過裸眼識(shí)別DNA。
　　隨后合成了半花菁染料TPTP，運(yùn)用核磁共振光譜、質(zhì)譜、元素分析等分析手段對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了確認(rèn)。在磷酸緩沖液中(

3、pH=7.4)中，通過紫外-可見吸收光譜、熒光光譜滴定，研究了小分子化合物TPTP與小牛胸腺DNA的相互作用，測(cè)定其與DNA的結(jié)合常數(shù)為2.92×107 M-2(R=0.9910)，檢測(cè)限為1.13×10-7 M;此外，通過DNA的熱變性實(shí)驗(yàn)定性地分析了TPTP與小牛胸腺DNA的相互作用模式主要為嵌插作用;DNA酶催化DNA水解實(shí)驗(yàn)，說明TPTP可以用于監(jiān)測(cè)DNA酶的活性及水解過程;通過生物細(xì)胞成像，證明TPTP可以選擇性地標(biāo)記死細(xì)胞中

4、的DNA; DNA電泳實(shí)驗(yàn)證實(shí)TPTP可以作為電泳凝膠成像實(shí)驗(yàn)中DNA的染色劑。
　　最后合成了半花菁染料C1、C2，通過核磁共振光譜、質(zhì)譜、元素分析等分析手段對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了確認(rèn)。在超純水中，通過紫外-可見吸收光譜、熒光光譜滴定，研究了小分子化合物C1、C2與小牛胸腺DNA的相互作用，測(cè)定其與DNA的結(jié)合常數(shù)分別為3.13×108 M-2(R=0.9987)和2.96×108 M-2(R=0.9954)，檢測(cè)限分別為1.13×