蛋白尿?qū)δI間質(zhì)纖維化的影響.pdf

1、腎小管間質(zhì)纖維化(TIF)病理表現(xiàn)主要以腎小管損傷，腎間質(zhì)單核炎癥細胞浸潤，間質(zhì)纖維化為特點，以腎間質(zhì)細胞外基質(zhì)沉積為主要表現(xiàn)。腎小管間質(zhì)纖維化(TIF)的機理不僅與間質(zhì)成纖維細胞增殖并轉(zhuǎn)變?yōu)榧±w維細胞有關(guān)，而且與細胞外基質(zhì)(ECM)增多及降解減少有關(guān)，還可與細胞凋亡等有關(guān)。很多的生長因子、血管活性物質(zhì)、細胞因子等參與了上述成纖維細胞的增殖、轉(zhuǎn)化及ECM增多的過程，其中轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth fact

2、or-beta,TGF-β1)是具有促纖維化作用重要的細胞因子之一，具有多種功能陷<'[8]>。TGF-β1可促進腎間質(zhì)細胞增生和細胞外基質(zhì)的合成和積聚，從而加重腎小球硬化和間質(zhì)纖維化，具體通過以下來影響TIF：(1)可以促進ECM的合成抑制ECM的降解；(2)抑制基質(zhì)降解酶的合成；(3)提高ECM受體的表達；(4)激活腎間質(zhì)成纖維細胞并使其增殖。但它在正常表達時有抗炎、抗增殖及抑制腫瘤的作用，長期抑制會對機體產(chǎn)生不利影響。而結(jié)締組織生

3、長因子(connective tissue growth factor，CTGF)是近年來發(fā)現(xiàn)的致纖維化作用的一個重要遞質(zhì)，它與TGF-β1生物學(xué)活性相似，其作用相對單一，能刺激細胞增殖及細胞外基質(zhì)的形成，在促進腎臟纖維化方面起重要作用。CTGF是1991年Bradham等<'[9]>首次在人臍靜脈內(nèi)皮細胞中發(fā)現(xiàn)的細胞因子，它是一種富含半胱氨酸多肽，廣泛存在于人類多種組織器官中，可能是TGF-β1促纖維活性下游信號介質(zhì)，主要介導(dǎo)TGF-

4、β1的促細胞增值和促細胞外基質(zhì)分泌作用。Ito等<'10>觀察到在慢性腎小管間質(zhì)損害部位，表達CTGFmRNA分子的細胞數(shù)明顯增多，并與間質(zhì)病變程度成正比，而且這些細胞主要以同時表達a-SMA的肌成纖維細胞為主。有學(xué)者體外實驗也證實CTGF參與了成纖維細胞向MyoF的轉(zhuǎn)分化過程。 本實驗著手于不同濃度的尿蛋白對于腎纖維化的影響，通過腎濾過率差異，小管功能損害指標(biāo)的差異以及相關(guān)炎癥因子之間的差異來進行研究，選擇病理為局灶節(jié)段硬化的

5、腎小球硬化癥患者做為研究對象。根據(jù)不同情況蛋白尿分組，追蹤六個月觀察蛋白尿?qū)π」荛g質(zhì)的損害，并通過對內(nèi)生肌酐清除率、NAG酶和CTGF的影響反映出來，了解蛋白尿和病情的發(fā)展和預(yù)后的關(guān)系。 目的：研究不同程度的蛋白尿?qū)τ谀I小管間質(zhì)纖維化進展的影響，了解不同蛋白尿?qū)τ趦?nèi)生肌酐清除率、尿液NAG酶和CTGF的影響。 方法：病例的選擇：選擇2005-2006年9月期間，在中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院腎病科住院，資料完整，并且經(jīng)過腎臟穿刺活

6、檢確診為原發(fā)性局灶節(jié)段腎小球硬化(FSGS)患者，共78例，然后追蹤調(diào)查，排除激素敏感者和血壓控制不佳，最后選擇其中48例進行研究，根據(jù)臨床表現(xiàn)，依照蛋白尿的情況分為三組，分別是>0.3g/d且<1.0g/d有18例；1.0g/d-5g/d有15例；>3.5g/d有15例，以及選擇15例健康人作為對照組。 1.分別計算四組患者的內(nèi)生肌酐清除率 1.1采用標(biāo)準(zhǔn)法計算公式然后根據(jù)體表面積標(biāo)準(zhǔn)化并進行糾正，體表面積標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)生

7、肌酐清除率計算方法如下： 內(nèi)生肌酐清除率Ccr(ml/min)=[尿肌酐×24小時尿量]/[血肌酐×24×60]矯正內(nèi)生肌酐清除率(ml/min)=內(nèi)生肌酐清除率×1.73/體表面積體表面積(m<'2>)=[身高(cin)×0.0061+體重(kg)×0.0128]-0.15291.2簡化MDRD計算公式MDRD方程7[14]eGFR(mHmin/1.73m<'2>)=170×[Pcr]<'-0.999>×[年齡(歲)]<'-0

8、.176>×[女性×0.762]×[BUN]<'-0.170>×[Alb]<'0318>。 1.2分別計算四組患者的內(nèi)生肌酐清除率，分別采用標(biāo)準(zhǔn)法計算公式公式，同時根據(jù)體表面積標(biāo)準(zhǔn)化并進行糾正，以及MDRD計算公式，跟蹤隨訪六個月，重復(fù)測量相應(yīng)的內(nèi)生肌酐清除率，進行統(tǒng)計學(xué)分析，找出各組變化的差異性。 2.收集四組研究對象的尿液，跟蹤六個月，重復(fù)收集上述患者的尿液，應(yīng)用CTGF試劑盒，使用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定尿液

9、中CTGF的數(shù)值，運用統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，同樣找出各組中可能存在的差異性。 3.收集四組研究對象的尿液，送我院化驗室送檢尿液NAG酶，跟蹤六個月，重復(fù)收集上述患者的尿液，進行化驗，尋找各組可能存在的差異性。 結(jié)果：對其中48例進行追蹤，不同蛋白尿的FSGS患者的內(nèi)生肌酐清除率和尿樣CTGF以及NAG酶的結(jié)果追蹤情況比較如下： 1.根據(jù)臨床上常用的內(nèi)生肌酐清除率的公式計算相應(yīng)的數(shù)值，采用標(biāo)準(zhǔn)化計算公式并根據(jù)體表面積

10、進行糾正，四組結(jié)果分別如下(ml/min，)：正常對照組追蹤前結(jié)果為96.21±13.82，<1.0g/d組患者的內(nèi)生肌酐清除率追蹤前為77.84±18.66，1.0-3.5g/d組患者的結(jié)果為69.27±14.15，>3.5g/d組患者的結(jié)果為67.48±15.93.追蹤以后對照組結(jié)果為101.61±17.83，<1.0g/d組患者的結(jié)果為70.13±0.61，1.0-3.5g/d組患者的結(jié)果為64.31±14.59，>3.5g/d組

11、患者的結(jié)果為56.62±19.62，從而我們可以看的出，追蹤前三組蛋白尿患者之間數(shù)值雖然不同卻并沒有明顯的差異性，但與對照組比較仍有明顯不同(P<0.05)，而追蹤后不同蛋白尿三組患者的內(nèi)生肌酐清除率都呈現(xiàn)下降的趨勢，但僅有>3.5g/d組患者追蹤前后的結(jié)果有明顯的變化(P-<0.05)。 2.使用簡化MDRD公式計算的結(jié)果如下：追蹤前對照組為99.81±16.48，<1.0g/d組，1.0g/d-3.5g/d組，>3.5g/d

12、組的結(jié)果分別為69.39±17.40，68.99±20.90和60.72±16.27，追蹤以后對照組結(jié)果為101.23±17.46，以上三組的結(jié)果分別為65.71±18.46，61.93±19.18和49.95±20.23，同樣可以看的出來追蹤前三組蛋白尿與正常對照組有差異(P<0.05)，而三組間差異性不大(P>0.05)，追蹤后不同蛋白尿三組患者的內(nèi)生肌酐清除率都呈現(xiàn)下降的趨勢，但僅有>3.5g/d組患者追蹤前后的結(jié)果有明顯的變化(

13、P<0.05)。 3.留取患者24小時的尿液，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定尿液中CTGF的數(shù)值(pg/ml.cr)分別為：正常組CTGF為11.75±1.96，而蛋白尿三組CTGF追蹤前結(jié)果，<1.0g/d組患者的CTGF值為116.53±16.39，1.0-3.5g/d組患者的結(jié)果為258.42±43.98，>3.5g/d組患者的結(jié)果為365.87±03.85；而追蹤后對照組結(jié)果為12.5±2.01，而以上三組的追蹤后結(jié)

14、果分別為123.13±20.11，281.63±55.53和478.20±119.75，可以看的出來，對照組和<1.0g/d組患者，1.0-3.5g/d組患者追蹤前后數(shù)據(jù)變化不大，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，而>3.5g/d組患者追蹤前后結(jié)果有明顯的變化(P<0.05)。 4.留取四組研究對象的尿樣，送我院檢驗科化驗NAG酶的結(jié)果(u/l)如下，正常對照組為1.54±0.13，而蛋白尿三組結(jié)果分別為24.97±5.91，34

15、.59±7.92和51.69±12.24，蛋白尿組與正常對照組之間均有差異；而追蹤后對照組為1.57±3.16，上述三組蛋白尿的結(jié)果分別為28.16±8.47，40.15±9.40和72.03±16.97，同樣發(fā)現(xiàn)大量蛋白尿組追蹤前后有明顯差異(P<0.05)。 結(jié)論： 1、蛋白尿在促使腎小管間質(zhì)纖維化的過程中起到重要的作用，蛋白尿?qū)?nèi)生肌酐清除率產(chǎn)生較大的影響。 2、蛋白尿?qū)τ诜从承」荛g質(zhì)損失的指標(biāo)如尿CTGF