維甲酸對大鼠腎間質(zhì)纖維化保護作用的研究.pdf

1、目的：腎小管間質(zhì)纖維化(RIF)是多種慢性腎臟病發(fā)展到終末期腎衰的共同途徑。它以過量細胞外基質(zhì)(如膠原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型、纖維連接蛋白和層連蛋白)在腎間質(zhì)積聚及腎間質(zhì)成纖維細胞增生為特征。腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生有4個步驟：①損傷和炎癥；②致纖維化因子的激活；③纖維化的形成；④纖維化對腎臟結(jié)構(gòu)和功能的影響。全反式維甲酸(atRA)是維生素A的活性代謝產(chǎn)物，在調(diào)節(jié)細胞增殖、分化、凋亡中起重要作用，主要用于治療急性早幼粒白血病，誘導白血病細胞分化成

2、熟，在治療皮膚病，腫瘤中也有潛在作用。近期的研究發(fā)現(xiàn)，atRA能抑制Thy-1抗體誘導的大鼠系膜細胞增殖以及細胞外基質(zhì)的積聚；從而保護腎功能，降低蛋白尿水平；對嘌呤霉素氨基核苷誘導的腎病大鼠腎小球足細胞有明顯保護作用，從而對腎臟損傷有預防和治療作用。因此推測atRA是干預腎小球進行性纖維化的新措施。為驗證這一假說，本研究以大鼠UUO模型，通過維甲酸能通過減少血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的含量，下調(diào)轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)的表達而延緩

3、腎間質(zhì)纖維化的進程，進而探索維甲酸對腎間質(zhì)纖維化的保護作用機制。 方法：選擇清潔級健康雄性SD大鼠36只，隨機分為假手術(shù)組(A組)、UUO組(B組)和維甲酸治療組(C組)，各12只。UUO組和維甲酸治療組大鼠2％戊巴比妥(50mg/kg)經(jīng)腹腔注射麻醉后，行左側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)建立動物模型，假手術(shù)組只游離輸尿管但不結(jié)扎。治療組在術(shù)前2天給予全反式維甲酸，全反式維甲酸溶于95％花生油和5％二甲亞砜(DMSO)中，10mg/kg(參考相

4、關(guān)實驗用藥劑量)皮下注射，每天1次至大鼠被處死。對照組每天僅皮下注射上述溶酶作為對照，實驗期間大鼠正常飲食及自由活動，于術(shù)后第3天、第7天、第14天每組各處死4只大鼠，留取血、24小時尿液標本及腎組織標本，檢測血肌酐、尿素氮、尿酸、24小時尿蛋白定量，用放免法檢測尿β2-MG；應用HE、MASSON染色觀察腎組織病理改變，并用免疫組化檢測腎組織AngⅡ、TGF-β1、Ⅲ型膠原在腎小管間質(zhì)纖維化大鼠中表達的動態(tài)變化。 結(jié)論：維甲酸