仙人掌提取物的分離及其抑菌性能的研究.pdf

1、本文對(duì)仙人掌提取物的分離及抑菌性能進(jìn)行研究，包括抑菌譜及最低抑菌濃度的確定，通過比較不同提取溶劑對(duì)抑菌活性的差異，篩選出最佳的提取劑，探討了提取物的穩(wěn)定性，優(yōu)化了抑菌活性物質(zhì)的提取工藝，并進(jìn)一步對(duì)抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行分離，最后對(duì)仙人掌提取物影響微生物正常代謝的作用機(jī)理進(jìn)行了研究，結(jié)果如下： 1．試驗(yàn)確定了仙人掌提取物的抑菌譜，證明仙人掌醇提取物對(duì)細(xì)菌有良好的抑制作用，霉菌次之，酵母菌最弱，特別是對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的抑制作用最

2、顯著，其最低抑菌濃度均低達(dá)6.25％。以大腸桿菌、根霉和酵母菌為指示菌，研究了仙人掌提取物的穩(wěn)定性。結(jié)果表明，提取物的抑菌活性具有較好的熱穩(wěn)定性，對(duì)紫外光照射穩(wěn)定，在中性和酸性條件下的抑菌效果較佳。 2．不同溶劑的提取物的對(duì)同一種菌的抑制作用差別較大，其中以甲醇和70％乙醇最好，實(shí)驗(yàn)結(jié)果依次排序?yàn)椋杭状?70％乙醇>乙酸乙酯>正己烷。在相同的時(shí)間內(nèi)，提取液的濃度越高，抑菌率越高；相同濃度的提取液，作用時(shí)間越長，抑菌率也越高。

3、 3．不同預(yù)處理方式對(duì)仙人掌提取物抑菌活性有一定的影響，以仙人掌干粉提取物的抑菌活性最好。仙人掌提取物的抑菌活性隨著溶劑極性的增、大而增強(qiáng)，其中以70％的乙醇為最適提取劑。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用RSA法試驗(yàn)設(shè)計(jì)，優(yōu)化出最佳提取條件為：乙醇濃度72％(v/v)、提取溫度58℃、料液比1：27(g/mL)。在此最優(yōu)工藝條件下，仙人掌提取物的抑菌效果最好。 4．對(duì)影響仙人掌黃酮類和皂甙類化合物提取率的相關(guān)因素進(jìn)行了分

4、析，運(yùn)用L<,9>(3<'4>)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)得出了仙人掌中黃酮類和皂甙類化合物的最佳的提取工藝條件。 5．1山人掌提取物抑菌機(jī)理研究：通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)仙人掌皂甙類和仙人掌黃酮類提取物對(duì)微生物糖酵解、三羧酸、磷酸戊糖等途徑均有不同程度的抑制作用，導(dǎo)致了ATP和還原力NADPH缺乏從而引起了代謝障礙；繪制出正常大腸埃希氏菌和仙人掌提取物作用下該菌的對(duì)比生長曲線，結(jié)果表明提取物主要抑制了細(xì)菌對(duì)數(shù)生長期的分裂；運(yùn)用SDS-PAGE電

5、泳的方法檢測發(fā)現(xiàn)，在一定濃度仙人掌提取物作用下菌體的表達(dá)蛋白譜帶比正常菌體的表達(dá)蛋白譜帶明顯減少，一些特有譜帶消失，仙人掌黃酮類和皂甙類提取物比單純粗提取物對(duì)菌體的表達(dá)蛋白正常代謝的干擾更強(qiáng)，可以說明仙人掌提取物對(duì)供試菌的細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)調(diào)控機(jī)制有一定的干擾作用；運(yùn)用透射電鏡對(duì)被抑制不同時(shí)間段的指示菌進(jìn)行觀察可知，供試菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)受仙人掌提取物作用發(fā)生很大的畸變?？傊扇苏铺崛∥飻_亂了茵體細(xì)胞內(nèi)正常的代謝活動(dòng)，導(dǎo)致細(xì)胞不再生長、繁殖，達(dá)