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1、本文以小麥赤霉病菌為供試病原菌,采用生長(zhǎng)速率法對(duì)毛竹提取物進(jìn)行了室內(nèi)抑菌活性測(cè)定;通過生物活性追蹤,在前期的工作基礎(chǔ)上,對(duì)毛竹提取物中的抑菌活性成分進(jìn)行了分離、純化和化學(xué)結(jié)構(gòu)的鑒定。主要研究結(jié)果如下:
1.以95%乙醇為提取溶劑,獲得毛竹提取物,并以小麥赤霉病菌等為供試病原菌,研究了毛竹提取物的抑菌活性。結(jié)果表明,毛竹提取物對(duì)不同供試病原菌均具有一定的抑制作用,其中,毛竹提取物對(duì)小麥赤霉病菌、蘋果腐爛病菌、辣椒疫霉病菌的48h
2、菌絲抑制率分別為100%、75.12%、60.66%;對(duì)蘋果輪紋病菌、梨黑心病菌、葡萄灰霉病菌的菌絲抑制率均小于50%。毛竹提取物對(duì)小麥赤霉病菌的EC50為25.2mg/L(y=19.490x+0.8403,R2=0.9926)。
2.以石油醚和乙酸乙酯為萃取溶劑,獲得毛竹提取物不同溶劑萃取組分,并以小麥赤霉病菌為供試病原菌,評(píng)價(jià)了毛竹提取物不同溶劑萃取組分的抑菌活性。結(jié)果表明,乙酸乙酯萃取組分對(duì)小麥赤霉病菌的48h抑制率為1
3、00%;石油醚萃取組分的菌絲抑制率為35.74%??梢?,毛竹提取物乙酸乙酯萃取組分對(duì)供試病原菌抑菌活性明顯強(qiáng)于石油醚組分。乙酸乙酯萃取組分對(duì)小麥赤霉病菌的EC50為18.4mg/L(y=17.498x+17.794,R2=0.9359)。
3.對(duì)毛竹提取物乙酸乙酯萃取組分進(jìn)行柱層析分離,共得到8個(gè)流分,以小麥赤霉病菌為供試病原菌,評(píng)價(jià)了乙酸乙酯萃取組分柱層析不同流分的抑菌活性。結(jié)果表明,硅膠柱層析不同流分對(duì)供試病原菌均具有一定
4、的抑制作用,其中第一流分(K1)、第二流份(K2)、第三流份(K3)和第四流份(K4)對(duì)小麥赤霉病菌的48h菌絲抑制率均為100%;K3和K4對(duì)小麥赤霉病菌的72h菌絲抑制率也均為100%,K1和K2則分別為81.95%和76.39%。
4.通過薄層檢測(cè),以竹葉黃酮純品葒草苷、異葒草苷、牡荊苷和異牡荊苷等4個(gè)主成分的標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照,通過薄層檢測(cè),發(fā)現(xiàn)K2、K3、K4的成分不同于上述4個(gè)竹葉黃酮的主成分,K5、K6、K7主要成分為
5、異葒草苷和異牡荊苷。以高活性的K3流分為對(duì)象,通過凝膠柱的分離、獲得活性成分S10,該化合物通過波譜分析等結(jié)構(gòu)鑒定,確定為反式對(duì)羥基肉桂酸(Trans-p-hydroxy cinnamic acid)。以小麥赤霉病菌為供試病原菌,反式對(duì)羥基肉桂酸標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照,驗(yàn)證了S10對(duì)菌絲的抑制作用。結(jié)果表明,20mg/L的S10和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)小麥赤霉病菌的72h菌絲抑制率分別為83.43%和81.76%,反式對(duì)羥基肉桂酸與S10對(duì)小麥赤霉病菌的EC5
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