基于ROS治療腫瘤的關(guān)鍵問題--ROS與其劑量效應(yīng)的探討.pdf

1、基于ROS治療腫瘤是抗癌的一種新思路，目前被認(rèn)為有可能成為腫瘤治療的一種基本手段。與正常細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞處于相對(duì)較高的氧化還原態(tài)，因此通過升高細(xì)胞ROS水平（促進(jìn)ROS生成或/和抑制ROS清除）可使腫瘤細(xì)胞先于正常細(xì)胞達(dá)到ROS死亡閾值，進(jìn)而死亡。在基于ROS的治療假說中，ROS被認(rèn)為是一種選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的有效手段。劑量-效應(yīng)關(guān)系是藥物治療學(xué)中最基本的治療原則，而ROS劑量與細(xì)胞毒性之間是否存在劑量-效應(yīng)關(guān)系，目前尚無報(bào)道。因此，

2、我們開展該項(xiàng)研究進(jìn)行ROS與其劑量效應(yīng)關(guān)系的探討。
　　在本研究中，我們隨機(jī)選擇了4種腫瘤細(xì)胞系(4T1、Bcap37、Hela、HepG2)和4例原代結(jié)直腸腫瘤細(xì)胞，利用不同氧化還原劑改變腫瘤細(xì)胞ROS水平，研究ROS改變對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響，進(jìn)而分析ROS水平與其細(xì)胞毒性之間的相關(guān)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，異硫氰酸苯乙酯(PEITC)和蓽茇酰胺(PL)在升高腫瘤細(xì)胞ROS水平的同時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞死亡;而與PEITC和PL相比，乳酸(LA)引

3、起更高的ROS水平卻不殺傷細(xì)胞;L-丁硫氨酸-亞砜亞胺(L-BSO)比PEITC、PL能更有效地降低細(xì)胞內(nèi)GSH含量、更顯著地升高ROS水平，卻允許細(xì)胞進(jìn)行性增殖。這些結(jié)果提示腫瘤細(xì)胞增殖或死亡與ROS水平高低或GSH含量多少之間無明顯相關(guān)性。為進(jìn)一步驗(yàn)證細(xì)胞死亡與ROS是否相關(guān)，我們通過還原劑氮乙酰半胱氨酸(NAC)和SOD-CAT類似物(EUK8、EUK134)降低PEITC、PL等藥物升高的ROS后，觀察細(xì)胞增殖或死亡情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)

4、果表明NAC(4mM)可逆轉(zhuǎn)PEITC、多柔比星(Dox)或三氧化二砷(ATO)升高的ROS，但不能阻斷它們導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;而相反，NAC(4mM)不能逆轉(zhuǎn)PL升高的ROS，卻可完全阻斷其導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;EUK8、EUK134均可逆轉(zhuǎn)上述藥物升高的ROS，但均不能阻斷藥物導(dǎo)致的細(xì)胞死亡。這說明細(xì)胞死亡與否與ROS高低之間不存在相關(guān)性。最后，我們?cè)谠Y(jié)直腸腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，LA在顯著升高腫瘤細(xì)胞ROS水平的同時(shí)并不殺傷腫瘤細(xì)胞;而與LA相