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文檔簡介
1、目的:通過應用聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、羥基磷灰石(HA)、納米銀為材料,制作多孔人工材料,用于修復犬的氣管軟骨缺損,以評估該氣管重建材料對聲門下氣管缺損的治療的有效性。
方法:⑴利用256層CT對實驗犬的喉部進行掃描,重建出氣管軟骨的大致形態(tài),了解犬氣管軟骨的大致直徑及軟骨厚度,應用CAD軟件設(shè)計模具,將凹凸模具以.STL格式導出,應用快速成型(RP)技術(shù)制造模具。使用羥基磷灰石(HA)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(P
2、LGA)為修復喉氣管軟骨缺損的材料,應用冷凍干燥法注模制備人工材料支架。⑵使用冷凍干燥法制備不同組分的(HA組、PLGA/HA組、PLGA/HA+納米銀組)的標準樣件(0.4×0.4×0.3cm)。取大鼠喉氣管軟骨片段,Ⅱ型膠原酶消化,傳代培養(yǎng)獲得軟骨細胞。將傳至第3代的軟骨細胞種植于96孔板內(nèi)三組不同的標準樣件上,分別于1、3、5、7天取出,用噻唑藍(MTT)法測定軟骨細胞的增殖活性。⑶選取10只實驗犬(雜種犬,體重10-15kg),
3、預實驗1只作為空白對照組,剩余隨機分為3組,按預制的人工氣管支架形狀切除3個氣管軟骨環(huán)形成缺損區(qū),將人工材料代替切除的氣管組織縫合至氣管上。A組為缺損區(qū)植入HA支架,B組為缺損區(qū)植入PLGA/HA支架,C組為缺損區(qū)植入PLGA/HA+納米銀支架。術(shù)后對實驗犬進行大體觀察,分別于術(shù)后1周、4周、8周處死,處死前對實驗犬行電子喉鏡檢測,處死后取出犬重建的氣管軟骨及周圍組織。
結(jié)果:①MTT法示PLGA/HA組、PLGA/HA+納米
4、銀組軟骨細胞增殖速度明顯高于HA組,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。說明PLGA/HA復合材料較單純的HA材料更有利于軟骨細胞的增殖。②空白對照組術(shù)后切口愈合差,切口紅腫,術(shù)后8周行電子喉鏡見缺損處肉芽生長,缺損處管腔Ⅰ°狹窄。術(shù)后8周組織切片可見缺損區(qū)大量纖維結(jié)締組織增生,且失去氣管軟骨原有形態(tài)。A組實驗犬術(shù)后切口出現(xiàn)紅腫、皮下積膿,術(shù)后4周、8周行電子喉鏡見手術(shù)缺損區(qū)管腔Ⅰ°狹窄,見肉芽組織生成。術(shù)后8周行組織切片見手術(shù)缺損區(qū)少量成
5、熟軟骨組織,炎性反應明顯,大量纖維結(jié)締組織增生。B組實驗犬術(shù)后切口出現(xiàn)紅腫、皮下積膿,術(shù)后1周、4周、8周行電子喉鏡見少許肉芽生長,無管腔塌陷現(xiàn)象發(fā)生。術(shù)后8周組織切片可見缺損區(qū)域大量成熟軟骨組織及纖維結(jié)締組織,炎性反應不明顯。C組實驗犬術(shù)后切口甲級愈合,行電子喉鏡見氣管內(nèi)黏膜未見炎癥,無肉芽生長,氣管管腔通暢。術(shù)后8周組織切片見有明顯新生軟骨生成,與正常軟骨相比組織學形態(tài)無差異,被覆上皮相同。
結(jié)論:⑴結(jié)合CAD建模及RP技
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