魷魚墨多糖和黑色素的研究.pdf

1、本文選用的北太平洋魷魚是最重要的魷魚加工品種之一，年加工量在15-30萬噸之間，在中國和日本，北太平洋魷魚的加工量尤其的多，在加工過程中，其廢棄物往往被丟棄，而很少有報道魷魚墨中生物活性的利用和研究。因此，本文以北太平洋魷魚墨為原料，探討魷魚墨中多糖和黑色素的結(jié)構(gòu)和功能，并展開了以下幾個方面的研究： 1)魷魚墨粗多糖的分離純化和化學(xué)組成分析。魷魚墨經(jīng)過酶法提取、乙醇沉淀和三氯乙酸除雜蛋白的方法提取得到了一種類似于糖胺聚糖的多糖粗

2、品，得率為1.5％，粗品通過sephacryl凝膠滲透色譜和Q-Sepharose FF陰離子交換色譜進行分級純化，得到兩個糖組成相對單一的組分，采用液相色譜和氣相色譜的方法鑒定了其糖組成，發(fā)現(xiàn)他們分別含有相同摩爾比例的葡萄糖醛酸，氨基半乳糖(或乙酰氨基半乳糖)。創(chuàng)新性的發(fā)現(xiàn)該種多糖不含硫酸根，和文獻報道不一致。采用醋酸纖維膜電泳和凝膠滲透色譜鑒定兩個組分的純度和分子量，SIP Ⅰ和SIP Ⅱ的分子量分別為52000和61000，純度為

3、96.1％和94.5％，且為同一類多糖，我們以SIPⅠ進一步研究對象。 2)魷魚墨黑色素的提取和活性研究。分析比較了不同提取方法對魷魚墨黑色素結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)堿法和酸法能夠?qū)е卖滛~墨黑色素的脫羧和脫氨基現(xiàn)象，而且能導(dǎo)致魷魚墨結(jié)構(gòu)的破壞。最終我們以高速離心法制備黑色素?？疾炝唆滛~墨黑色素的體外自由基清除活性發(fā)現(xiàn)，魷魚墨黑色素清除超氧陰離子自由基和羥基自由基的IC<,50>值分別為0.2 mg/mL和0.015 mg/

4、mL，遠低于肌肽的0.53mg/mL和0.1mg/mL．小鼠體內(nèi)免疫活性實驗的各項指標均表明，魷魚墨黑色素體內(nèi)給藥能增強小鼠的細胞免疫和體液免疫功能以及巨噬細胞的吞噬能力，且不影響小鼠的正常體重，可開發(fā)為一種新的人體免疫增強保健食品。 3)魷魚墨黑色素與金屬離子的螯合作用。黑色素對Fe(Ⅲ)、Pb(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)最大吸附量分別為1.43mM/g，0.93mM/g，以及0.65mM/g。溫度對于黑色素螯合金屬離子沒有太大的影響。

5、pH為4吸附率較高，用EDTA和HC1對于洗脫已與黑色素螯合的金屬離子有很好的效果，研究了不同濃度的鹽對黑色素螯合金屬離子的影響，發(fā)現(xiàn)鹽對Fe(Ⅲ)及Pb(Ⅱ)的影響較小，而Cd在低濃度條件下，吸附率也能達到85％以上。進一步采用紫外光譜紅外光譜的結(jié)果表明，魷魚墨黑色素在與Cd(Ⅱ)，Pb(Ⅱ)，F(xiàn)e(Ⅲ)三種金屬離子的螯合過程中，本文都發(fā)現(xiàn)了羧基，羥基和亞胺基這三個魷魚墨黑色素與金屬離子結(jié)合位點的特征峰的減弱，這三個官能團都參與了黑色