基于異鼠李素為雜交指示劑的電化學DNA生物傳感器的研究.pdf

1、DNA電化學生物傳感器是近幾年迅速發(fā)展起來的一種全新的生物傳感器，它是進行核酸結(jié)構(gòu)分析和檢測的重要手段之一，其特點是測定快速、簡便、靈敏、價廉。 DNA電化學生物傳感器研制的關鍵技術之一是高靈敏度雜交指示劑的篩選。本論文以電化學和紫外.可見光譜方法為主要研究手段，對具有抗癌、抗菌活性的黃酮類化合物異鼠李素電化學性質(zhì)及與鮭魚精DNA的相互作用機理進行了研究，篩選出異鼠李素作為高靈敏度、高特異性的雜交指示劑，用于檢測急性早幼粒細胞白

2、血病PML-RARα融合基因。 實驗結(jié)果表明，黃酮類小分子異鼠李素在優(yōu)化的條件下以嵌插方式結(jié)合到dsDNA雙螺旋堿基對中。由電化學研究結(jié)果可以看出，異鼠李素與dsDNA之間形成了一種非電活性的超分子化合物而導致峰電流減小。紫外-可見光譜顯示dsDNA的加入導致最大吸收峰減色并伴有紅移，此現(xiàn)象證實異鼠李素與鮭魚精dsDNA發(fā)生嵌插結(jié)合。由電化學動力學參數(shù)結(jié)合率和結(jié)合常數(shù)的測定可知，異鼠李素與DNA形成2:1復合物，結(jié)合常數(shù)為1.0

3、3×105L/mol。 以異鼠李素為雜交指示劑，選用共價鍵合法制備了DNA電化學傳感器，該傳感器具有高特異性、高靈敏度、較低檢測限。當互補鏈DNA濃度在2.0×10-5～1.2×10-7mol/L范圍內(nèi)，峰電流與其濃度呈良好的線性關系，線性回歸方程為Ip(μA)=0.2378C(μM)+2.269，相關系數(shù)r=0.9973，檢出限為1.5×10-9 mol/L(S/N=3)。 本文首次研制的基于異鼠李素為新型雜交指示劑的