熱凝腦膜中動脈對偏頭痛大鼠CGRP、SP水平和c-fos基因表達的影響.pdf

1、偏頭痛是一種常見發(fā)作性單側(cè)搏動性神經(jīng)血管紊亂疾病,常伴有畏光、畏聲、惡心和嘔吐等癥狀。目前研究顯示三叉神經(jīng)血管系統(tǒng)在偏頭痛的發(fā)病過程中起重要作用。三叉神經(jīng)血管周圍感覺纖維和外周信號傳導(dǎo)通路中三叉神經(jīng)尾核的激活與偏頭痛的疼痛發(fā)生有關(guān)。神經(jīng)肽,如降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin-gene relatedpeptide,CGRP)、P物質(zhì)(substance P,SP)和神經(jīng)激肽A(neurokinin A,NKA)的釋放及三叉神經(jīng)尾核

2、神經(jīng)元c-fos基因表達免疫反應(yīng)陽性(c-fos LI)是三叉神經(jīng)系統(tǒng)激活的標志物。研究顯示CGRP與SP共存于三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)細胞及由它們支配腦血管的神經(jīng)傳導(dǎo)通路上。直接化學、熱或電刺激嚙齒類三叉感覺神經(jīng)可引起主要由速激肽(如SP和NKA)介導(dǎo)的血管滲透性改變及CGRP介導(dǎo)的血管擴張。此外,研究表明偏頭痛發(fā)作時血CGRP和SP水平升高。偏頭痛患者輸注CGPR可誘發(fā)延遲性偏頭痛發(fā)作。而且,研究發(fā)現(xiàn)偏頭痛治療藥物舒馬曲坦可以降低CGRP水平

3、。此外,作為神經(jīng)活性標志物早期即刻基因c-fos是中樞神經(jīng)系統(tǒng)研究最多的基因之一。三叉神經(jīng)尾核c-fos基因表達水平常表明神經(jīng)元的激活狀態(tài)。腹腔注射硝酸甘油構(gòu)建的偏頭痛動物模型其三叉神經(jīng)尾核c-fos基因表達,而且該基因持續(xù)表達充分證明三叉神經(jīng)中樞通路的激活。
　　 目的：
　　 最近,我們發(fā)現(xiàn)采用結(jié)扎腦膜中動脈和/或顳淺動脈、巖淺大神經(jīng)切斷術(shù)可有效治療頑固性偏頭痛,表明腦膜中動脈參與偏頭痛的發(fā)病過程。本研究試圖通過評估

4、熱凝腦膜中動脈對硝酸甘油誘導(dǎo)的偏頭痛大鼠靜脈血CGRP和SP含量及三叉神經(jīng)尾核c-fos基因表達的影響,旨在探討熱凝腦膜中動脈有效治療頑固性偏頭痛的確切機制,為頑固性偏頭痛手術(shù)價值的評估提供一定理論和實驗依據(jù)。
　　 方法
　　 48只健康雌性Wistar大鼠隨機分為四組:生理鹽水組(A組):皮下注射生理鹽水;硝酸甘油組(B組):皮下注射硝酸甘油注射液10 mg/kg構(gòu)建偏頭痛動物模型;假手術(shù)組(C組):單純暴露腦膜中動

5、脈后皮下注射硝酸甘油注射液10mg/kg和手術(shù)組(D組):熱凝腦膜中動脈后皮下注射硝酸甘油注射液10 mg/kg。觀察各組大鼠行為學變化,成功建模后每組隨即平分為兩小組分別采用RT-PCR和Western blot法檢測大鼠三叉神經(jīng)尾核c-fos基因表達及應(yīng)用放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)檢測各組大鼠靜脈血CGRP和SP含量。
　　 結(jié)果：
　　 皮下注射硝酸甘油注射液(10 mg/kg)誘導(dǎo)的大

6、鼠偏頭痛模型會出現(xiàn)頻繁撓頭,爬籠和耳紅等表現(xiàn)。A組大鼠偶爾出現(xiàn)撓頭現(xiàn)象,B組與C組大鼠均出現(xiàn)了嚴重的偏頭痛癥狀。D組大鼠與B、C組大鼠相比,撓頭及爬籠次數(shù)明顯減少且頻度降低,無耳紅現(xiàn)象。四組大鼠靜脈血CGRP含量((x)±s)分別為(12.14±4.99)pg/ml,(57.34±10.27)pg/ml,(51.40±13.13)pg/ml和(27.96±8.32)pg/ml;SP含量分別為(6.78±2.09)pg/ml,(20.03

7、±5.74)pg/ml,(22.33±6.83)pg/ml和(13.27±2.31)pg/ml。B、C及D組大鼠靜脈血CGRP、SP含量及三叉神經(jīng)尾核c-fos mRNA和蛋白相對表達水平與A組相比均有增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P值均＜0.05),且D組大鼠靜脈血CGRP和SP含量及三叉神經(jīng)尾核c-fos mRNA和蛋白相對表達水平低于B和C組大鼠,差異具有統(tǒng)計學意義(P值均＜0.05),但B與C組之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。