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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br> 本研究將應(yīng)用病理HE染色方法檢測百草枯中毒大鼠肺組織病理變化及病理損傷程度,應(yīng)用免疫組織化學(xué)及Western blot方法檢測百草枯中毒大鼠肺組織中熱休克蛋白(HSP70)的表達(dá)水平。探索百草枯致大鼠急性肺損傷的發(fā)生機(jī)制,對臨床工作中百草枯中毒患者早期的救治提供有利的線索。
實(shí)驗(yàn)方法
72只健康Wistar大鼠隨機(jī)平均分成3組,分別腹腔注射生理鹽水(A組)、20 mg/kg百草枯(B組
2、)和40 mg/kg百草枯(C組)。各組動物1、2、3、6、12和24 h隨機(jī)編入6個(gè)觀察時(shí)點(diǎn)。造模前,各組大鼠禁食12 h,不禁水。A組大鼠腹腔注射1 ml生理鹽水,B組和C組大鼠用生理鹽水將PQ稀釋至1 ml腹腔注射染毒。每組分別于6個(gè)觀察時(shí)點(diǎn)用10%水合氯醛腹腔注射后處死4只大鼠,留取肺組織標(biāo)本,左側(cè)肺組織置于4%多聚甲醛中固定12 h,用于HE染色,免疫組織化學(xué)染色。取右側(cè)肺組織放于-70℃冰箱備用,Western blot方法
3、測定肺組織中HSP70的表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
HE染色,染毒大鼠肺組織發(fā)生急性肺損傷、透明膜的形成和炎性細(xì)胞浸潤等急性肺損傷典型的病理改變。免疫組織化學(xué)結(jié)果,B組中HSP70的表達(dá)于2 h開始升高,6 h達(dá)到峰值,24 h與A組無差別。C組中HSP70的表達(dá)于1 h開始升高,3 h達(dá)到峰值,24 h與A組無差別。且C組2、3和12 h的表達(dá)均顯著高于B組。Western blot結(jié)果,B組大鼠2、3、6 h時(shí)點(diǎn)H
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