百草枯中毒大鼠肺組織HSP70、NF-κB mRNA的表達(dá)及烏司他丁的干預(yù)作用.pdf

1、目的:
　　 探討在百草枯(paraquat,PQ)所致急性肺損傷(acute lung injury,ALI)過(guò)程中熱休克蛋白70(heat shock protein,HSP70)和NF-κB p65 mRNA在肺組織中的表達(dá)及烏司他丁(uliInastatin,UTI)干預(yù)作用。
　　 方法:
　　 隨機(jī)將健康成年SD大鼠72只分三組:空白對(duì)照組(A組),單純PQ染毒組(B組)和UTI治療組(C組),每組各

2、24只。B組和C組用PQ一次性灌胃(80 mg/kg)染毒建立SD大鼠中毒模型；A組等量生理鹽水灌胃；C組于PQ灌胃后30 min腹腔內(nèi)注射UTI(100000U/kg),以后每12小時(shí)一次；A組和B組等量生理鹽水腹腔內(nèi)注射。各組于染毒后12、24、48、72 h處死大鼠留取標(biāo)本。分別檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)支氣管肺泡灌洗液(BALF)中白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比和蛋白含量及肺濕/干重比(W/D)；觀察各時(shí)間點(diǎn)肺組織大體改變和HE染色光鏡下改變；

3、采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)肺組織中HSP70和NF-κB p65 mRNA的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:
　　 (1)肺組織W/D比較:與A組比較,B組各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)肺W/D明顯增高(p皆<0.01)；C組雖較A組增高(p皆<0.05),但較B組降低(p皆<0.05)。
　　 (2)BALF中蛋白含量變化:B、C組與A組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較明顯增高(P皆<0.01)；C組較B組各時(shí)間點(diǎn)明顯降低(P皆

4、<0.01)。
　　 (3)BALF中WBC計(jì)數(shù):與A組比較,B、C組各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)BALF中WBC總數(shù)明顯增高(P皆<0.01)；C組各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)WBC總數(shù)較B組明顯降低(P皆<0.01)。
　　 (4)BALF中PMN百分比變化:與對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較,B組BALF中PMN百分比較A組明顯增高(P皆<0.01)；C組雖較A組增高(12、24h,P<0.05；48、72h,P<0.01),但較B組各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)降低(P皆<0.0

5、5)。
　　 (5)肺組織HSP70 mRNA表達(dá)情況:與A組相比,B組肺組織HSP70mRNA的表達(dá)在染毒后12 h明顯增強(qiáng)(P<0.01),24 h達(dá)高峰。與B組相比,C組肺組織HSP70mRNA各個(gè)對(duì)應(yīng)時(shí)點(diǎn)的表達(dá)均明顯增強(qiáng)(P皆<0.01),峰值仍在24h。
　　 (6)肺組織NF-κB p65 mRNA表達(dá)情況:PQ中毒后,B組肺組織NF-κBp65mRNA表達(dá)明顯高于A組(P皆<0.01)；C組雖然高于A組(1

6、2h,P<0.05；24、48、72h,P<0.01),但明顯低于B組(P皆<0.01)。
　　 (7)肺組織病理學(xué)變化:大體觀察A組肺臟呈粉紅色,無(wú)充血、水腫及梗死灶。B組肺呈暗紅色,肺體積增大,明顯充血、水腫,可見(jiàn)廣泛的點(diǎn)或灶狀出血,切口可見(jiàn)粉紅色泡沫樣液體溢出。C組充血、水腫較PQ組輕,于肺臟邊緣可見(jiàn)少許梗死灶。光鏡檢查:B組可見(jiàn)肺灶性出血,肺泡壁明顯增厚,肺泡和肺間質(zhì)水腫,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),部分切片可見(jiàn)灶狀肺不張,肺氣腫