纖維素酶高產(chǎn)菌選育及發(fā)酵條件的研究.pdf

1、以產(chǎn)纖維素酶菌株里氏木霉TrichodermareeseiRutC-30為出發(fā)菌株，經(jīng)紫外、亞硝基胍(NTG)多次誘變和添加L-山梨糖及自然篩選相結(jié)合的方法，篩選得到一株遺傳特性穩(wěn)定的高產(chǎn)突變菌株WX-112，搖瓶發(fā)酵液濾紙酶活提高到4.20IU/mL。 研究了里氏木霉WX-112的搖瓶分批發(fā)酵條件。在發(fā)酵培養(yǎng)基單因素影響試驗的研究基礎(chǔ)上，首先運用正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計優(yōu)化了搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源；然后應(yīng)用快速登高試驗法逼近最大產(chǎn)酶區(qū)域

2、，最后運用響應(yīng)面分析試驗法確定了4個重要因素的最佳水平，并研究了發(fā)酵培養(yǎng)條件。在此優(yōu)化條件下，搖瓶最終發(fā)酵液濾紙酶活力可以達(dá)到12～13IU/mL，CMCase酶活480～510IU/mL。比初始條件提高了近三倍。 以分批發(fā)酵最優(yōu)條件為依據(jù)，對菌株WX-112進(jìn)行了補(bǔ)料分批發(fā)酵研究。搖瓶補(bǔ)料分批發(fā)酵的最佳初始Avicel濃度為2％，在發(fā)酵過程第48h，72h進(jìn)行間歇全組分補(bǔ)料。在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了30L發(fā)酵罐分批發(fā)酵試驗和補(bǔ)料分批發(fā)

3、酵試驗，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵過程中采用分段控制溫度和溶解氧的工藝，產(chǎn)酶較不分段控制有明顯提高。最后，采用分段控制溫度和溶氧及全組分補(bǔ)料工藝，進(jìn)行30L罐分批發(fā)酵，F(xiàn)PA酶活和CMCase酶活可分別達(dá)到15.24IU/mL和596.70IU/mL。 采用板框過濾及超濾膜分離工藝，對發(fā)酵液進(jìn)行了提取濃縮。液體酶總收率為73～77％，液體濃縮酶FPA酶活力達(dá)到45IU/mL，CMCase1800IU/mL。 對酶的性質(zhì)作了初步研究。得出了