纖維素酶高產(chǎn)菌誘變選育及發(fā)酵工藝初步研究.pdf

1、本文利用離子束注入技術(shù)對(duì)纖維素酶產(chǎn)生菌進(jìn)行了誘變選育研究。纖維素酶是一種誘導(dǎo)酶，它可以由細(xì)菌、真菌產(chǎn)生。利用微生物產(chǎn)生的纖維素酶可以有效的分解和轉(zhuǎn)化纖維素。
　　 分離到一株能夠產(chǎn)生纖維素酶的菌株，并摸索了該菌株的發(fā)酵周期，確定發(fā)酵時(shí)間為168h。通過對(duì)菌落形態(tài)觀察，以及利用18srDNA序列分析，將該菌株定為爪哇正青霉(Eupenicillium javanicum)。
　　 用離子束對(duì)纖維素酶產(chǎn)生菌爪哇正青霉進(jìn)行了誘

2、變選育，研究了不同N+注入劑量和能量下的N+對(duì)爪哇正青霉存活率的影響。通過幾輪誘變，最終篩選到一株酶活較高的突變株D602。對(duì)D602的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，得到適宜D602菌株的最佳發(fā)酵工藝，培養(yǎng)基成分為(g/l)：麥秸粉+麩皮(1∶1)，20；(NH4)2SO4+脲+蛋白胨，2.6；KH2PO42.0；(NH4)4SO41.4；MgSO4.7H2O0.3； CaCl20.3；FeSO4.7H2O0.005；MnSO40.001

3、6，培養(yǎng)基初始pH值為6左右，在250ml搖瓶裝液量40ml，搖床轉(zhuǎn)速240rpm，發(fā)酵溫度28℃，種齡、接種量分別為12小時(shí)、1ml時(shí)，該菌株液體發(fā)酵產(chǎn)的纖維素酶的酶活達(dá)到47.54IU/ml。
　　 酶的基本酶學(xué)性質(zhì)是酶應(yīng)用的基礎(chǔ)，故對(duì)液體發(fā)酵所產(chǎn)的纖維素酶的粗酶液性質(zhì)進(jìn)行了研究。發(fā)現(xiàn)該菌株粗酶液的最適反應(yīng)pH值4.0，pH值在5.0-6.0范圍內(nèi)穩(wěn)定；最適反應(yīng)溫度為55℃，在40℃以下，纖維素酶活力可以保持很長(zhǎng)的時(shí)間。低濃