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文檔簡介
1、本研究通過免疫組化方法檢測硫化氫的兩種關(guān)鍵酶CBS、CSE在人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠胎盤組織及臍動靜脈血管內(nèi)皮及平滑肌中的表達情況,并應(yīng)用血管環(huán)等長張力實驗測定外源性硫化氫和一氧化氮對人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠離體臍動靜脈血管平滑肌的調(diào)節(jié)作用,探討硫化氫和一氧化氮的可能作用機制,為預(yù)防和治療子癇前期提供理論依據(jù)。
第一部分 CBS、CSE在子癇前期和正常妊娠胎盤血管中的表達及外源性H2S對離體臍動靜脈血管平滑
2、肌的舒縮作用
研究目的:檢測CBS、CSE在人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠的胎盤及臍動、靜脈血管內(nèi)皮平滑肌中的表達;測定外源性硫化氫對人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠離體臍動靜脈血管平滑肌舒縮作用。
研究方法:1、用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠的胎盤及臍動、靜脈血管內(nèi)皮及平滑肌中的表達。2、應(yīng)用血管環(huán)等長張力實驗測定外源性硫化氫對人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠離體臍動、靜脈血管平滑
3、肌舒縮作用,方法如下:向掛入血管環(huán)的浴槽中加入80mmol/L高鉀溶液預(yù)收縮,待收縮反應(yīng)曲線至平臺后,累積給予10-160μmo/L硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS),觀察記錄硫氫化鈉對80mmol/L高鉀溶液所致血管環(huán)收縮的舒張作用。
結(jié)果:1、免疫組化結(jié)果顯示,在輕、重度子癇前期和正常妊娠的胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞的胞漿中均見CBS、CSE的陽性表達;在臍動、靜脈血管內(nèi)皮及平滑肌中偶見CBS、CSE的陽性表達。
2、
4、1)臍動、靜脈在80mmol/L高鉀溶液的作用下均發(fā)生明顯收縮,且臍動脈收縮的幅度大于臍靜脈(P<0.01);2)輕、重度子癇前期組血管環(huán)對80mmol/L高鉀溶液的收縮反應(yīng)均高于正常組(P<0.01);重度子癇前期組血管環(huán)對80mmol/L高鉀溶液的收縮反應(yīng)高于輕度子癇前期組(P<0.05);3)硫氫化鈉(NaHS)對輕、重度子癇前期和正常組臍動、靜脈血管均有舒張效應(yīng),并呈濃度依賴性;硫氫化鈉(160μmo/L)對輕、重度子癇前期組血
5、管環(huán)的舒張作用均弱于正常組(P<0.01);重度子癇前期組血管環(huán)的舒張作用弱于輕度子癇組(P<0.05)。
結(jié)論:1)在人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠的胎盤血管中均有CBS、CSE的陽性表達,說明人胎盤血管中可以生成內(nèi)源性硫化氫,并且可能在妊娠過程中發(fā)揮生理作用;2)外源性硫氫化鈉對輕、重度子癇前期組和正常妊娠組離體臍動靜脈血管均有舒張效應(yīng),并且呈濃度依賴性;硫化氫對輕、重度子癇前期組舒張作用低于正常組;重度子癇前期組血
6、管環(huán)的舒張作用弱于輕度子癇組,說明硫化氫對于輕、重度子癇前期和正常妊娠血管平滑肌敏感性存在不同,重度子癇前期對硫化氫的敏感性較弱。
第二部分外源性NO對子癇前期和正常妊娠離體臍動靜脈血管平滑肌的舒縮作用
研究目的:測定一氧化氮對人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠的離體臍動靜脈血管平滑肌舒縮作用。
研究方法:應(yīng)用血管環(huán)等長張力實驗測定外源性一氧化氮對人足月輕、重度子癇前期和正常妊娠的離體臍動靜脈血管
7、平滑肌舒縮的作用,方法如下:向掛入血管環(huán)的浴槽中加入80mmol/L高鉀溶液預(yù)收縮,待收縮反應(yīng)曲線至平臺后,按濃度遞進方式加入一氧化氮(NO)供體硝普鈉(SNP)溶液(10-8~10-5mol/L),觀察記錄其舒張作用。
結(jié)果:1)在10-8~10-5mol/L的濃度范圍內(nèi),硝普鈉對輕、重度子癇前期組和正常組的離體臍動、靜脈血管平滑肌均有明顯的舒張作用,并且呈劑量依賴性;2)硝普鈉對輕、重度子癇前期組舒張作用弱于正常組(P
8、<0.01);重度子癇前期組舒張作用弱于輕度子癇組(P<0.05)。
結(jié)論:1)一氧化氮對人足月輕、重度子癇前期組和正常妊娠組的離體臍動靜脈血管平滑肌均有明顯的舒張作用,并且呈劑量依賴性;2)一氧化氮對正常組血管平滑肌的舒張作用大于子癇前期組;重度子癇前期組舒張作用弱于輕度子癇組。結(jié)果說明一氧化氮對于輕、重度子癇前期和正常妊娠血管平滑肌敏感性存在不同,重度子癇前期對一氧化氮的敏感性較弱;與硫化氫相比,對臍動靜脈血管舒張作用
9、特性兩者類似。
總結(jié):1、人足月輕、重度子癇前期組和正常妊娠組的胎盤血管中均發(fā)現(xiàn)有硫化氫的兩種關(guān)鍵酶CBS、CSE的陽性表達,說明人胎盤血管中可以生成內(nèi)源性硫化氫,并且可能在妊娠過程中發(fā)揮生理作用。
2、硫化氫和一氧化氮對輕、重度子癇前期和正常妊娠離體臍動靜脈血管平滑肌均有舒張作用,并且呈濃度依賴性。兩者對子癇前期組舒張作用低于正常組,重度子癇前期組舒張作用弱于輕度子癇組。結(jié)果說明硫化氫和一氧化氮對于輕、重度
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