2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩128頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、脂肪組織除了作為機(jī)體最大的能量儲(chǔ)存器官外,還能夠分泌大量的細(xì)胞因子,統(tǒng)稱為脂肪細(xì)胞因子。抵抗素是近年來發(fā)現(xiàn)的一種調(diào)控動(dòng)物糖、脂代謝及胰島素敏感性的重要的脂肪細(xì)胞因子,已有的證據(jù)表明,抵抗素在胰島素抵抗和脂質(zhì)異位沉積中發(fā)揮重要作用。近年來發(fā)現(xiàn)的一種小分子miRNA,可以通過抑制靶基因的翻譯而參與哺乳動(dòng)物許多生物學(xué)過程的調(diào)控。本研究以人和小鼠抵抗素為研究對象,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western Blotting、細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染、雙熒光素酶

2、報(bào)告系統(tǒng)以及染色質(zhì)免疫共沉淀等技術(shù),對miRNA參與抵抗素誘導(dǎo)的胰島素抵抗及脂質(zhì)異位沉積調(diào)控機(jī)制進(jìn)行了研究。
  本研究主要內(nèi)容包括:⑴采用芯片技術(shù),對抵抗素處理及對照小鼠肝臟組織miRNA進(jìn)行差異表達(dá)分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)抵抗素處理引起上調(diào)miRNA有25個(gè),下調(diào)miRNA為51個(gè),表明在抵抗素處理后小鼠肝臟組織miRNA呈現(xiàn)差異性表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證結(jié)果與芯片結(jié)果一致。⑵利用生物信息學(xué)方法對差異表達(dá)miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測及信

3、號(hào)通路分析,結(jié)果顯示差異表達(dá)miRNA涉及眾多糖、脂代謝、線粒體及炎癥相關(guān)基因(如C/EBPβ、GSK3β、PPARα、ACSL1、SREBP1、NRF1、IRS-1、IRS-2、Sirt1、TNF等)及信號(hào)通路(如AMPK信號(hào)通路、胰島素信號(hào)通路、脂肪細(xì)胞因子信號(hào)通路、PPAR信號(hào)通路、脂肪酸氧化信號(hào)通路、氧化磷酸化信號(hào)通路以及T2DM信號(hào)通路等)的轉(zhuǎn)導(dǎo)。⑶以HepG2細(xì)胞為模型,通過細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,研究了miR-145在抵抗素誘導(dǎo)胰島

4、素抵抗中的調(diào)控機(jī)制。結(jié)果表明,人重組抵抗素在HepG2細(xì)胞通過p65依賴的方式上調(diào)miR-145的表達(dá),上升的miR-145以IRS-1為靶基因損傷胰島素信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo),抑制細(xì)胞對葡萄糖的吸收,導(dǎo)致肝臟胰島素抵抗的發(fā)生。⑷研究了miR-34a在抵抗素誘導(dǎo)脂肪異位沉積中的調(diào)控機(jī)制。結(jié)果表明,miR-34a在脂肪肝模型小鼠肝臟中顯著上升,且重組抵抗素能夠顯著上調(diào)HepG2細(xì)胞中miR-34a的表達(dá)。過表達(dá)的miR-34a增加了HepG2細(xì)胞甘

5、油三酯的含量,但線粒體數(shù)量下調(diào),線粒體膜電位也顯著降低。通過雙熒光素酶報(bào)告基因及WesternBlotting表明miR-34a能夠以AdipoR2為靶基因,調(diào)控其蛋白水平表達(dá)。⑸Western Blotting分析表明,miR-34a通過AdipoR2抑制了PPARα信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo),引起SREBP-1c的上調(diào),從而增加胞內(nèi)甘油三酯的合成;miR-34a的過表達(dá)同時(shí)損傷了AMPK信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo),引起ACC1α磷酸化水平的下調(diào)及CTP1α

6、蛋白表達(dá)的抑制,造成胞內(nèi)脂肪酸氧化受阻,從而進(jìn)一步增加了甘油三酯的聚集。⑹乙酰化水平檢測結(jié)果表明,miR-34a通過抑制Sirt1的蛋白水平而導(dǎo)致PGC-1α乙?;潭仍黾?,抑制了PGC-1α對核呼吸因子NRF1的轉(zhuǎn)錄激活作用,從而引起細(xì)胞線粒體數(shù)目的下降。⑺ChIP研究結(jié)果表明,C/EBPβ能夠直接結(jié)合在miR-34a的啟動(dòng)子上激活其轉(zhuǎn)錄表達(dá),而siC/EBPβ則能夠回復(fù)抵抗素對miR-34a的上調(diào)作用,表明抵抗素通過C/EBPβ而調(diào)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論